生产用于静脉给药的免疫球蛋白和其他免疫球蛋白产品的方法

摘要

本发明涉及一种从含免疫球蛋白的粗制血浆蛋白组分中纯化免疫球蛋白G的方法。所述的方法包括一系列步骤,其中优选依次结合使用阴离子交换柱和阳离子交换柱。在整个纯化方法中优选使用一种pH5.0－6.0摩尔浓度约5－25mM的醋酸盐缓冲液。本发明进一步包括通过本发明方法获得的免疫球蛋白产品。本发明还涉及一种纯度超过98%、IgG单体和二聚体含量大于98.5%、IgA含量少于4mg/L并含有少于0.5%的聚合物和聚集体的免疫球蛋白产品。所述产品不包含作为稳定剂的去污剂,PEG或白蛋白。所述产品稳定、无病毒、呈液体,可直接用于静脉给药。

主权项

1、从含免疫球蛋白的粗制血浆蛋白组分中纯化免疫球蛋白即免疫球蛋白G(IgG)的方法，包括以下步骤：(a)制备含免疫球蛋白的粗制血浆蛋白组分的水相悬浮液；(b)在上述步骤(a)的悬浮液中加入足够量的一种可溶于水的不使蛋白变性的沉淀剂，沉淀大部分非免疫球蛋白G的蛋白、免疫球蛋白聚集体和诸如病毒颗粒的潜在感染性颗粒的颗粒，而基本上不造成免疫球蛋白G单体的沉淀，这样形成了一种固体沉淀和液体上清的混合物；(c)从步骤(b)的混合物中回收澄清的含免疫球蛋白G的上清；(d)将步骤(c)澄清的含免疫球蛋白G的上清加至阴离子交换树脂，再加至阳离子交换树脂；(e)用pH和离子强度足以去除树脂中的蛋白杂质，而基本上不造成免疫球蛋白G洗脱的的缓冲液洗去蛋白杂质和蛋白沉淀剂；(f)用pH和离子强度足以有效洗脱免疫球蛋白G的基本上非变性缓冲液洗脱免疫球蛋白G，从而回收含免疫球蛋白G的洗脱液；(g)将步骤(f)含免疫球蛋白G的洗脱液进行透滤/超滤以浓缩和/或透析洗脱液并任选地加入稳定剂；(h)在步骤(g)已透滤/超滤并任选地加入稳定剂的含免疫球蛋白G的组分中加入病毒致死剂量的病毒灭活剂形成基本上无病毒的含免疫球蛋白G的溶液；(i)将步骤(h)含免疫球蛋白G的溶液加至阴离子交换树脂纯化再接着加至阳离子交换树脂；(j)用pH和离子强度足以从树脂中有效洗去蛋白杂质和病毒灭活剂而基本上不造成免疫球蛋白G的洗脱的缓冲液洗步骤(i)的阳离子交换树脂；(k)用pH和离子强度足以有效洗脱免疫球蛋白G的基本上非变性缓冲液从步骤(ｊ)的阳离子交换树脂洗脱免疫球蛋白G，由此回收含免疫球蛋白G的洗脱液；以及(l)透滤/超滤步骤(k)的含免疫球蛋白G的洗脱液以降低离子强度并浓缩免疫球蛋白G溶液，加入糖类物质调节重量摩尔渗透浓度。