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"LEVEDURAS RECOMBINANTES ESTáVEIS PARA FERMENTAR XILOSE A ETANOL" A presente invenção refere-se a leveduras recombinantes estáveis, que fermentam xilose a etanol e que mantêm sua capacidade para tal desempenho quando cultivadas, através de numerosas gerações, em meios não seletivos. A levedura preferida contem cópias múltiplas de genes integrados que codificam xilose redutase, xilitol desidrogenase e xiluloquinase fundidas a promotores que não são inibidos pela presença de glucose e que não requerem xilose para indução. São também descritos métodos preferidos para integrar cópias mútiplas de DNA exógeno em células hospedeiras por meio da transformação de células com vetores replicativos/integrativos, e então replicando-se as células, várias vezes, sob pressão seletiva para promover a retenção do vetor em gerações subseq³entes. Os vetores replicadores servem, assim, para integrar cópias múltiplas do DNA exógeno nas células hospedeiras por toda a fase de replicação/seleção. Depois disso, a pressão seletiva pode ser removida para promover a perda do vetor em gerações subsequentes, deixando os integrantes estáveis do DNA exógeno. |
