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<B>MéTODO E KIT BASEADO EM PCR PARA A IDENTIFICAçãO DE ANEUPLOIDIAS CROMOSSÈMICAS HUMANAS ESPECìFICAS<D>. O objetivo da presente invenção é a identificação a nível molecular de possíveis aneuploidias cromossómicas humanas em fetos humanos a partir de mercadores cromossómicos altamente polimórficos, utilizando as técnicas de amplificação simultânea de vários microssatélites pela PCR (PCR multiplex) e análise por DALAC. Uma primeira concretização da presente invenção diz respeito a um método de identificação de aneuploidias cromossómicas em tecidos de fetos abortados espontaneamente ou de natimortos, pela PCR multiplex utilizando iniciadores construídos a partir de marcadores altamente polimórficos correspondentes a microssatélites situados nos diferentes cromossomos mais frequentemente envolvidos em aneuploidias fetais (cromossomos 13, 16, 18, 21, X e Y). Uma segunda concretização da presente invenção diz respeito a um método de identificação da trissomia 21 em células de líquido amniótico colhido por amniocentese no segundo ou terceiro trimestre de gestação pela PCR multiplex utilizando iniciadores construídos a partir de três ou mais marcadores do cromossomo 21 para garantir informatividade e permitir confirmação interna de resultados normais ou anormais. Numa terceira concretização, a invenção é dirigida para a produção de kits diagnósticos que utilizam os processos descritos acima. Um kit básico compreende todos os reagentes necessários para permitir a detecção de aneuploidias cromossómicas usando as técnicas de PCR multiplex que constituem as duas invenções acima, a saber: mistura de iniciadores fluorescentes, nucleotídeos e solução tampão apropriada para a ampliação por PCR. Opcionalmente o kit pode conter a enzima Taq polimerase em quantidades suficientes para amplificação, solução de amostra para preparar o material amplificado para eletroforese, DNA genómico humano como controle, escadas alélicas, e um protocolo e manual para instruir o usuário. As quantidades dos vários reagentes dos kits podem variar de acordo com a aplicação específica.
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