通过载体构建体与细胞DNA的非同源重组来表达内源基因

摘要

本发明一般性地涉及通过原位重组法来活化基因表达或导致基因过表达。本发明还一般性地涉及使内源基因在细胞中以高于正常细胞中所见的水平进行表达的方法。在本发明的一个实施方案中,在整合到细胞中后,通过活化基因表达的调控系列的一个能活化内源基因表达的调控序列的非同源或非法重组;来活化或提高该内源基因的表达。在另一个实施方案中,通过共整合一或多个扩增标记并选择位于整合载体上的拷贝数增加的该一或多个扩增标记,从而进一步提高所述内源基因的表达。本发明还提供了鉴定和表达那些用目前技术无法发现的基因的方法,因为整合不需要靶序列。本发明还提供了分离编码跨膜蛋白质的核酸分子(特别是cDNA分子)的方法,以及分离能表达这种可能是其异源跨膜蛋白质的跨膜蛋白的细胞的方法。本发明还涉及分离的基因、基因产物、核酸分子和含有这些基因、基因产物及核酸分子的组合物,所述组合物可用于多种治疗和诊断用途。因此,利用本发明,可以活化和分离内源基因,包括那些与人类疾病和发育相关的基因,而不需要预先知道这些基因的序列、结构、功能或表达特性。

主权项

1．一种本质上由与未配对的剪接供体序列及一或多个扩增标记可操纵地连接在一起的转录调控序列组成的载体构建体。