| 主权项 |
1.一种测定血管增生之方法,其包括将一获得自胎 盘组织的血管片段与一包括纤维蛋白凝胶及适当 养份之培养基一起培养一段时间,且于足够使得新 血管组织生长的状况下,其中该片段培养于1毫升 或者更少的培养体积中且其中该养份很少更换,同 时并检查该片段以决定新血管组织是否已经生长 。2.根据申请专利范围第1项之方法,其中该片段为 人类来源。3.根据申请专利范围第1或2项之方法, 其中并不加入额外的血管增生剂至培养基。4.根 据申请专利范围第1或2项之方法,其中含有适当养 份之培养基为体积0.5至1毫升。5.根据申请专利范 围第1或2项之方法,其中养份更换是以频率少于每 两天一次施行。6.根据申请专利范围第1或2项之方 法,其中的片段为直径1至2微米且长度少于5公分, 偏好长度1至2微米。7.一种试验物质之血管增生调 节活性之方法,其包括将得自一胎盘组织以及一包 括纤维蛋白凝胶之培养基,适当养份以及至少一怀 疑具有血管增生调节活性之物质一起培养一段时 间并在足以使得新血管组织生长之条件下,其中该 片段培养于1毫升或者更少的培养体积中且其中该 养份很少更换,同时检查该片段之新血管组织生长 并与控制组比较该生长。8.根据申请专利范围第7 项之方法,其中该血管增生调节活性是抑制血管增 生。9.根据申请专利范围第7项之方法,其中该血管 增生调节活性是增强或促进血管增生活性。10.根 据申请专利范围第8项之方法,其中该培养条件包 括体积约0.5至1.0毫升。11.根据申请专利范围第7项 之方法,其中该片段之检查是经由自动化方法达成 ,偏好经由片段影像之电脑分析。12.根据申请专利 范围第7至9项中任一项之方法,其中该物质之复数 型式为与片段之复数型式分开培养。13.根据申请 专利范围第7项之方法,其中该片段为直径约1至2毫 米且长度少于5公分,偏好长度为1至2毫米。14.根据 申请专利范围第7项之方法,其中该生物检体为人 类来源。15.根据申请专利范围第11项之方法,其中 该提供条件包含一基本上不含血清之培养基。16. 一种测定物质诱发新血管组织之退化之方法,其包 括将一获得自胎盘组织的血管片段与一包含纤维 蛋白凝胶之培养基以及适当养份一起培养一段时 间,且足使得新血管组织生长的状况下,其中该片 段培养于1毫升或者更少的培养体积中且其中该养 份很少更换,施用该物质至该片段,以及将片段与 适当养份一起培养一段时间,且于同样的状况下, 之后检查该片段以测定新血管组织之退化是否已 发生。17.根据申请专利范围第16项之方法,其中该 片段为人类来源。18.根据申请专利范围第16项之 方法,其中该片段为直径1至2毫米且长度少于5公分 ,偏好长度为1至2毫米。 10.根据申请专利范围第16项之方法,其中该片段之 检查为经由自动化方法偏好经由片段影像之电脑 分析达成。 20.一种使用于根据申请专利范围第7或16项之方法 中之套组,其包括隔间化形成一第一隔间或隔间群 ,其适用于容纳一包括纤维蛋白凝胶之培养基供作 血管片段之培养,该片段系来自1毫升或者更少之 培养体积的胎盘组织,其中该第一隔间或隔间群为 选择性地适用于包含一或更多的凝胶前驱物,及第 二隔间或隔间群,其适用于包含养份或营养培养基 供作加入至包括纤维蛋白凝胶之培养基中以支持 血管片段之生长。 21.根据申请专利范围第20项之套组,其中该第一隔 间或隔间群为适用于以容纳0.5至1.0毫升之培养基 。图式简单说明: 第一图为包埋于纤维蛋白凝胶中人类胎盘血管片 段之活体外血管增生之图形表示。在(A)中血管增 生反应为手工记录于0至3之任意比例上如材料与 方法中所描述。每次将8个培养物之平均値标准 误差打点。在(B)中血管增生反应为经由基于电脑 之数位影像之像素分析。 第二图显示使用包埋于一纤维蛋白凝胶中之人类 胎盘血管片段之活体外血管增生之显微镜照相。 血管增生在14天培养后以(A)x25以及(B)x200倍放大显 示。第二图A中之血管增生反应为人工评分为3。 第三图为图形表示并证明该试验可应用于测验不 同化合物抑制血管增生之能力。在整个试验中以 化合物之使用是以下列浓度:肝素以及低分子量( LMW)肝素-100微克/毫升,苏拉明(suramin)-10微克/毫升 以及100微克/毫升如显示,DMSO-0.5%,氢可体松(Hydro)-10 -5M以及锌-20M。〝Cont〞意指一控制培养物其中 不加入化合物。数据表示血管增生,如藉由数位影 像分析,在培养14天后。垂直条纹表示平均値之标 准误差(n=4)。 第四图为图形表示并证明该试验可应用于测验多 株抗体对抗血管增生性生长因子aFGF,bFGF以及VEGF抑 制血管增生之能力。数据为如第三图之表示。在 试验中使用之控制组抗体如柱状图注解中以山羊 Ig及兔子Ig表示。 第五图为图形表示并证明该试验可应用于测验不 同浓度之bFGF,aFGF以及VEGF在血清饥饿培养中增强人 类血管增生之能力。数据为如第三图之表示。注 意在50微毫克/毫升VEGF时激发血管相当的〝回枯〞 。 |
