利用辅助肽制造肽的方法

摘要

在通过基因重组制造具有生物学活性的目的肽过程中,其特征是在目的肽上附加了辅助肽后使其表达。通过这样操作调整了等电点,可以防止回收和纯化工序中的凝集,提高离子交换层析的回收率,提高在使目的肽在以与其它肽形成的融合蛋白形式表达的情况下通过酶裂解使目的肽游离之际酶反应时的该融合蛋白的溶解度,提高在目的肽必须通过酶修饰的情况下酶反应时的该肽的溶解度,这样以来可以使目的肽的纯化效率以及收率提高。

主权项

1.具有生物学活性的肽的制造方法，该方法包括如下工序：工序(1)：利用含有编码附加了辅助肽的目的肽或编码在附加了辅助肽的目的肽基础上又进一步附加了保护肽的融合蛋白的碱基序列的表达载体转化细胞，然后培养该转化细胞，从该培养物中收集附加了上述辅助肽的目的肽或上述融合蛋白的工序；工序(2)：当从工序(1)中得到融合蛋白时，从该融合蛋白中裂解分离附加了辅助肽的目的肽与保护肽，按照要求进一步进行纯化的工序；工序(3)：在有必要对目的肽进行修饰时，对工序(1)或工序(2)得到的附加了辅助肽的目的肽实施修饰反应的工序；工序(4)：从工序(1)、工序(2)或工序(3)得到的附加了辅助肽的目的肽中裂解分离辅助肽与目的肽，按照需要进一步进行纯化的工序，以及工序(5)：对在工序(4)中得到的目的肽进行纯化的工序。