RNA循环逆转录反应方法

摘要

本发明属生物工程技术领域,是一种循环逆转录反应方法。其过程为对待扩增的RNA模板加热变性后,将RT引物结合到RNA链上,由逆转录催化酶催化RT引物延伸合成cDNA,形成RNA－DNA杂合双链,重复变性－复性－延伸,循环反应几十次,随后根据需要可偶联PCR扩增或直接用于cDNA文库克隆。本发明可有效提高RNA分析和检测灵敏度,技术设计简单易行,操作简便,成本低。本发明可应用在一切RT应用领域。特别适应于RNA相关的临床检测和分析。

主权项

1．由一份RNA模板循环逆转录得到多倍份的cDNA的反应方法，其特征在于，反应体系在热循环仪上进行热变性-复性-延伸等3个步骤的循环反应过程，每个循环过程控制每步骤的温度和时间参数为：变性，温度条件：89～95℃，保温时间：5～120秒；复性，温度条件：55～68℃，保温时间：5～90秒；延伸，温度条件：60～70℃，保温时间：60～180秒。