| 摘要 |
<p>La présente invention concerne l'identification de sites d'amorce d'amplification et d'amorce de séquençage qui permettent le typage basé sur la séquence de chacun des gènes HLA classiques dans des réactions d'une solidité et d'une stabilité élevées sans perte d'allèle. Pour déterminer la séquence d'ADN, et par conséquent le type d'au moins un exon d'un gène HLA-A, HLA-B et HLA-C présent dans l'échantillon, on combine l'échantillon avec un mélange réactionnel d'amplification contenant les amorces d'amplification et on l'amplifie pour former un produit d'amplification comprenant l'exon 2 et l'exon 3 du gène dans un seul fragment. On combine alors le produit de l'amplification avec un mélange réactionnel de séquençage contenant un ou plusieurs oligonucléotides amorces de séquençage qui s'hybrident avec les régions conservées du produit de l'amplification. Les oligonucléotides amorces de séquençage produisent de façon efficace des fragments de séquençage de tous les allèles connus de l'exon 2 ou de l'exon 3 du gène dans des conditions appropriées à la production de fragments de séquençage. On évalue ensuite les fragments de séquençage pour déterminer la séquence de l'exon 2 ou de l'exon 3 du gène de l'échantillon.</p> |
