通过天然化学连接的蛋白质的合成

摘要

具有天然肽骨架的中等大小的蛋白质通过天然的化学连接方法进行生产。天然的化学连接作用采用了一种由两个未保护的肽链段的化学选择性反应,从而生成一种过渡态的硫酯连接的中间体。然后该过渡态的硫酯连接的中间体自发地进行重排,从而生成在连接位点处具有一个天然肽键的全长的连接产物。该全长连接产物在化学上与由无细胞合成所生产的蛋白质相同。全长的连接产物可以重折叠和/或氧化,从而生成天然的含有二硫化物的蛋白质分子。该天然化学连接技术可以用于化学合成全长的蛋白质。

主权项

1.一种用于为生产寡肽产物而头尾相连地连接第一寡肽和第二寡肽的方法，该方法包括以下步骤：步骤A：在含有一种催化的硫醇(thiol)的反应溶液中混合第一寡肽和第二寡肽，其中第一寡肽含有一个C-末端硫酯，第二寡肽含有一个具有一个未氧化的巯基侧链的N-末端半胱氨酸；然后步骤B：为了生产一种以一个β-氨基硫酯键连接第一和第二寡肽的中间体寡肽，用C-末端硫酯缩合N-末端半胱氨酸的未氧化的巯基侧链；并且然后步骤C：为了生产以一个酰胺键连接第一和第二寡肽的寡肽产物，所说步骤B的中间体寡肽的β-氨基硫酯键进行重排。