应用重组质粒制备反义寡脱氧核苷酸的方法

摘要

反义寡核苷酸(Antisense Oligonucletides)是一类具有抗病毒、抗癌等潜力的核酸类药物。应用重组质粒生产反义寡脱氧核糖核苷酸(即反义DNA)为反义核酸低成本大规模生产提供了一条开创性的方法。本发明大体可概括为将含反义寡核苷酸顺序的双链用内切酶的方法插入质粒中，待重组质粒扩增后，用内切酶切下含反义寡核苷酸顺序的双链，核酸酶S₁除去粘性末端，再将此双链片段修饰成乙基、磷酸三酯化的反义寡聚脱氧核糖核苷酸单链。

主权项

此专利是一种独创的适用于所有反义寡脱氧核糖核苷酸的大量制备方法，其专利权保护内容是。(1)用质粒将含反义寡脱氧核苷酸片段插入，经重组质粒在大肠杆菌中高拷贝后，再从质粒上切下含反义顺序的短片段，此片段经乙酰化、磷酸三酯化和水解成所需的反义寡脱氧核苷酸单链。