A METHOD OF PRODUCING A POLYPEPTIDE PRODUCT AND A PLASMIDIC EXPRESSION VEHICLE THEREFOR, A METHOD OF CREATING AN EXPRESSION PLASMID, A METHOD OF CLEAVING DOUBLE STRANDED DNA, AND SPECIFIC PLASMIDS

摘要

METODO PARA PRODUCIR UN POLIPEPTIDO HETEROLOGO MEDIANTE EXPRESION BACTERIANA DE UN GEN ESTRUCTURAL QUE LO CODIFICA, QUE COMPRENDE (A) DISPONER UN INOCULANTE BACTERIANO TRANSFORMADO CON UN VEHICULO DE EXPRESION PLASMIDICO REPLICABLE CON UNA SECUENCIA DE ADN DE DOBLE HEBRA, EN FASE DESDE UN PRIMER EXTREMO 5' A UN SEGUNDO EXTREMO 3' DE LA HEBRA CODIFICADORA DEL MISMO, LOS ELEMENTOS: (I)UN SISTEMA PROMOTOR-OPERADOR DE TRP BACTERIANO; (II)NUCLEOTIDOS QUE CODIFICAN PARA UN LUGAR DE FIJACION DE RIBOSOMAS PARA TRADUCCION DEL ELEMENTO (IV); (III) NUCLEOTIDOS QUE CODIFICAN PARA UNA SENALDE COMIENZO DE TRADUCCION DEL ELEMENTO (IV); Y (IV) UN GEN ESTRUCTURAL QUE CODIFICA LA SECUENCIA DE AMINOACIDOS DE UN POLIPEPTIDO HETEROLOGO; (B) COLOCAR EL INOCULANTE TRANSFORMADO EN UN RECIPIENTE DE FERMENTACION Y HACERLO CRECER Y (C) PRIVAR LAS BACTERIAS DEL ADITIVO PARA DESREPRIMIR EL SISTEMA Y OCASIONAR LA EXPRESION DEL PRODUCTO PARA QUE CODIFIQUE EL GEN ESTRUCTURAL.