小麦醇溶蛋白的蛋白分子微胶囊制备方法

摘要

本发明用凝胶过滤等手段纯化了一个天然蛋白质—小麦醇溶蛋白，该蛋白质在一定浓度的溶剂系统中经过搅拌处理可成膜成泡称为蛋白分子微胶囊。蛋白分子微胶囊在透射电子显微镜下观察直径为0.70—2.0μm，腔直径为0.66—1.89μm，膜的厚度为0.025μm，能包裹分子量为0.4kd—150kd的化合物。蛋白分子微胶囊具有良好的稳定性和通透性，经低温冷冻干燥后可压成鳞片状，加水后又可复原仍保持蛋白分子微胶囊的脱水、吸水、泡的稳定性(Dehydration-Rehydration-Vesicles即DRV)。

主权项

1、纯化后的小麦醇溶蛋白的蛋白分子微胶囊制备方法，其特征是：包括小麦醇溶蛋白的纯化方法、微胶囊悬液和微胶囊干粉的制备方法， 1)小麦醇溶蛋白的纯化方法： 小麦粉经过200目过筛，并以1∶4的重量比加入40-90%的乙醇进行浸泡提取，经4-6小时后200目尼龙绸过滤，该滤液用于醇溶蛋白的纯化；取占胶床体积1-3%的上述滤液，通过胶床体积为38.0毫升的SephadexLH₂₀柱层析纯化，其柱直径与高度的比为1.5厘米：22.5厘米，洗脱速度为0.2毫升/分钟，在此条件下，经过40-90%的乙醇洗脱得到的第一个峰值即为纯化的小麦醇溶蛋白，该蛋白组成中疏水氨基酸为26.4%-32.9%，其中含有五种脂肪酸侧链氨基酸即丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸和脯氨酸，另有一种芳香族氨基酸为苯丙氨酸，该蛋白的N-未端氨基酸为苯丙氨酸； 2)用上述经纯化的小麦醇溶蛋白以0.5-5.0mg/ml的浓度与水，伊文斯兰(Evan′sblue)混合，蛋白质溶液，水，伊文斯兰(Evan′sblue)三者的体积比为(3-4)∶(0-4)∶(1-3)混合后加入蔗糖脂肪酸酯为总体积的0.1%，在室温(15-25℃)下进行200-1000rpm，10-20分钟的混合搅拌，制备成为微胶囊悬液；再于-20℃下冷冻干燥，制成微胶囊干粉，此粉经加水至原体积复溶后仍保持原胶囊微型结构的膜完整性，此称为冷冻干燥及吸水复原特性或称DRV特性(Dehydration-Rehydration-Vesicles)；