从玉米籽粒制取超氧化物歧化酶的方法

摘要

本发明属于生物化学领域中酶的制取方法，涉及从玉米中制取超氧化物歧化酶的方法。其特征是工艺方法为：浸泡玉米；粉碎；上清液超滤浓缩；浓缩液反复浓缩；浓缩液离心除去沉淀物得上清液；上清液超滤脱盐得超氧化物歧化酶。本发明工艺简单，生产周期短，适合于工业化生产，可向医药、食品、日用化妆品等行业提供价格低廉、安全可靠的超氧化物歧化酶产品。

主权项

1、一种从玉米籽粒制取超氧化物歧化酶的方法，其特征在于工艺方法为：(1)、浸泡玉米：将玉米籽粒洗净后，加入浸泡液，在10～50℃温度下浸泡20～70小时，诱导产生超氧化物歧化酶；(2)、粉碎：吸胀后的玉米籽粒加入1.5～3倍的PH=8～8.5，0.05～0.1摩尔/升的硫酸铵-氨水缓冲液和硫代硫酸钠、二硫苏糖醇匀奖，然后搅拌，提取0.5～2小时，离心，过滤；(3)、上清液超滤浓缩：高速离心除去固形物，然后过滤得到提取液；(4)、浓缩液加硫酸铵盐析后，离心，超滤去杂蛋白，脱盐后再浓缩，提取液通过超滤装置浓缩至原来体积的1/4；(5)、浓缩液经DE-32，P-30柱层析分离，加入固体硫酸铵至30-60饱合度盐析，使大部分杂质蛋白沉淀，然后离心除去沉淀物得上清液；(6)、上清液通过超滤进一步去除杂蛋白，然后反复超滤脱盐，并浓缩后冷冻干燥，得精品超氧化物歧化酶。