利用大肠杆菌制备可用来检验C型肝炎之抗原蛋白的方法

摘要

本发明是利用大肠杆菌的表达系统，表达一段C型肝炎病毒(HCV)核心抗原部分的DNA片段。经过热诱导表达出来的蛋白质，能专一性地被大部分感染有非A非B型肝炎病人的血清所识别，但不被健康人血清所识别。利用此抗原蛋白进行的C型肝炎的诊断结果，与利用亚培试剂的抗C100-3诊断结果相比，本发明所制备的抗原蛋白比亚培试剂的诊断结果灵敏，且能相辅相成，降低假阴性的结果。因而由本发明所制备的抗原蛋白质，可作为检验C型肝炎的一种良好检验试剂。

主权项

1、一种利用大肠杆菌制备可用来检验C型肝炎病毒(HCV)的抗原蛋白质的方法，其特征在于制备此种抗原蛋白质的方法包括：(a)合成一段HCV的cDNA片断；(b)从该HCV的cDNA片断合成HCV的核心抗原cDNA片断；(c)将该核心抗原cDNA片断克隆到以PvuⅡ及SalⅠ切过的表达质体pG408N的P1转录入起动子，而得到的质体pG408N-C；(d)将所得到的pG408N-C质体转入含有cI857基因的大肠杆菌；(e)将该菌在30℃下培养，菌浓度至0.D680=0.3-0.5，再升温至40-43℃；(f)再于36-38℃下培养；(g)分离菌体而得到HCV的抗原蛋白质。