| 摘要 |
<p>L'invention se rapporte à un procédé de synthèse d'acides nucléiques possédant une longueur d'au moins 200 ou 500 bases, y compris des brins atteignant une longueur de plusieurs kb, dans lequel au moins un des quatre NTP est totalement substitué par un ribo ou désoxyribonucléotide marqué par fluorescence r- ou dNTP-X. Le procédé comprend l'utilisation de composés de dNTP-X dont la fraction de base de nucléotide est reliée de façon covalente au fluorogène par une chaîne de liaison d'une longueur de 8 à 12 atomes, l'utilisation d'une ADN polymérase processive, ainsi que l'utilisation d'une protéine de liaison d'ADN à monobrin dans le mélange réactionel. L'invention décrit également de nouveaux composés s'utilisant dans la synthèse de l'ADN fluorescent complètement marqué, ainsi qu'un kit servant à mettre en application ledit procédé. Le procédé décrit par l'invention est efficace dans l'obtention d'ADN ou d'ARN fluorescent totalement marqué servant à effectuer des analyses de séquences, dans le marquage fluorescent histochimique, ainsi que dans des techniques microanalytiques nécessitant un ADN ou un ARN extrêmement fluorescent et possédant une séquence spécifique.</p> |
