| 摘要 |
L'invention concerne un procédé permettant de déterminer la quantité d'ADN cible dans un échantillon, ce procédé comprenant les étapes suivantes: (a) division de l'échantillon en une pluralité d'aliquotes; (b) addition à chaque aliquote d'une quantité connue d'un ADN concurrent qui est le même que l'ADN cible sauf qu'il comprend un site de reconnaissance pouvant être détecté directement ou indirectement par une espèce marquée, de sorte que le rapport entre l'ADN cible et l'ADN concurrent est différent dans les aliquotes; (c) co-amplification de l'ADN cible et de l'ADN concurrent dans chaque aliquote par la réaction de chaîne de polymérase (PCR) en utilisant au moins une amorce qui permet l'immobilisation de l'ADN co-amplifié, les sites de recuit des amorces de la PCR utilisés étant à l'extérieur du site de reconnaissance; (d) marquage de l'ADN concurrent amplifié; (e) avant ou après l'étape (d), immobilisation de l'ADN co-amplifié s'il n'était pas déjà immobilisé, par l'intermédiaire d'au moins une amorce PCR; (f) estimation de la quantité de l'étiquette de marquage sur l'ADN concurrent amplifié immobilisé dans chaque aliquote pour obtenir une indication de la quantité d'ADN cible dans l'échantillon. |
