摘要 |
Sont présentées des méthodes de production de protéines de fusion comprenant celles ayant des activités biologiques doubles. Ces méthodes comprennent la nécessité d'avoir une première et une seconde séquence d'ADN codant respectivement un premier et un second polypeptide, la digestion de la première séquence d'ADN dans un site de restriction adjacent à son terminus 3' ou 5', et la ligature d'une séquence de liaison/adaptation (1/a) à l'extrémité restreinte de la première séquence d'ADN, formant ainsi une cassette. La séquence 1/a comprend, à une extrémité, la partie de la première séquence d'ADN qui s'étend depuis son terminus le plus proche du site de restriction jusqu'au site de restriction, à l'autre extrémité, la séquence comprend un côté d'un site soudé. Une cellule d'accueil eucaryotique est transfectée avec la cassette et la seconde séquence d'ADN ayant, à une extrêmité, un côté d'un site sr la séquence 1/2. La cellule d'accueil transfectée est cultivée pour exprimer l'ADN transfecté comme une protéine de fusion à chaîne unique. |