IMMUNOGLOBULIN A1 PROTEASES (IgA1 PROTEASES), METHOD OF GENE-TECHNOLOGICALLY PRODUCING THIS TYPE OF ENZYME AND VACCINES CONTAINING THE ENZYMES AND FRAGMENTS THEREOF FOR IMMUNIZING AGAINST BACTERIAL MENINGITIS AND OTHER DISEASES CAUSED BY IgA1 PROTEASE-PRODUCING BACTERIA.

摘要

La sécrétion de protéases IgA1 est une caractéristique de l'Haemophilus influenzae, ainsi que de plusieurs autres germes pathogènes bactériens provoquant des maladies infectieuses, entre autres la méningite. Une constatation indirecte suggère que les protéases sont des facteurs de virulence importants. Le gène iga codant la protéase IgA1, notamment celle provenant du sérotype b de H. influenzae, a été cloné en Escherichia coli dans lequel le gène Iga de recombinaison a été exprimé et la protéase ainsi obtenue sécrétée. La mise en séquence d'une partie d'un fragment d'ADN de 7,5 kb contenant ledit gène Iga a révélé un grand cadre de lecture ouvert (ORF) à forte utilisation de codons, et ayant un potentiel de codage d'une protèine de 1541 acides aminés, ainsi qu'une masse moléculaire de 169 kd. On a identifié des éléments putatifs promoteurs et terminateurs se trouvant sur les flancs de l'ORF. La comparaison entre la séquence d'acides aminés déduite de la prothéase IgA1 de H. influenzae produite, avec celle d'une protéase similaire provenant de Neisseria gonorrhoeae révèle plusieurs domaines ayant un degré élevé d'homologie. Analogue à des mécanismes connus provenant de la sécrétion de protéases IgA de N. gonorrhoeae, l'invention concerne un schéma de modifications de post-translation du précurseur de protéase IgA1 de H. influenzae, conduisant à une protéase sécrétée d'une masse moléculaire de 108 kd, proche des 100 kd Mr estimés pour la protéase IgA1 mature.