摘要 |
L'invention concerne une réaction de chaîne polymérase (PCR) basée sur une méthode de mise en séquence appelée amplification génomique avec mise en séquence directe (GAWTS) qui évite le subclonage et permet au moins de quintupler la vitesse d'acquisition de séquences. Le procédé implique la fixation d'un promoteur de phages sur au moins l'un des agents d'amorçage de la réaction de chaîne polymérase (PCR). Les segments amplifiés par PCR sont transcrits pour augmenter encore le signal et pour produire une abondance d'un gabarit monobrin pour la mise en séquence didésoxy induite par une transcriptase d'inversion. Un agent d'amorçage d'une transcriptase d'inversion à terminaison marquée complémentaire de la séquence désirée génère la spécificité additionnelle requise pour produire des données de séquence non ambiguës. |