特定胺类作为抗管素(ANTITUBULIN)活性及抗性监测检测探针之用途

摘要

本发明系关于使用某种可抑制真核细胞生长的醯胺做为探针于结合检定分析筛检化合物之抗微管蛋白(antitubulin)活性，监测及定量微管蛋白(tubulin)抗性之方法，该醯胺具有结构式其中A为环烷基，烷基，卤烷基，烷硫基，卤烷硫基，烯基，卤烯基，炔基，卤炔基，烷氧基，卤烷氧基或苯基，啶基，喃基，吩基，异唑基，唑基，咯基，异唑基，唑基，唑基，咪唑基，嘧啶基，基，异基，基，嗒基，基，苯骈吩基，基，苯骈喃基或基，全部皆可以可接受方式以至多4个取代基取代； R1及R2分别为氢原子，烷基，卤烷基，烯基，卤烯基，炔基或卤炔基，但R1及R2非皆为氢原子；及 X，Y及Z分别为氢原子，卤原子，氰基，硫氰基，异硫氰基，或烷基磺醯氧基，但X，Y及Z中之至少一者非为氢原子：或其光学对映异构物。

主权项

1.一种进行结合检定分析之方法,其可用于筛选具 抗微管蛋白活性之化合物、监测抗性及测定真核 细胞、细胞萃出物及微管蛋白制剂内微管蛋白含 量,其系利用可抑制真核细胞生长之醯胺,该醯胺 类具有结构式(II) 其中 R1及R2分别为氢原子,(C1-C6)烷基,卤(C1-C6)烷基,(C2-C6) 烯基或(C2-C6)炔基,但R1及R2非皆为氢原子; R3,R4及R5分别为氢原子,卤原子,氰基,(C1-C6)烷基,卤( C1-C6)烷基,(C2-C6)烯基,(C2-C6)炔基,(C1-C6)烷氧基,(C1-C6 )烷硫基,卤(C1-C6)烷基,硝基,-NR6R7,-CR8=NOR9,-NHCOOR10,- CONR11R12或-COOR13;或R4及R5共同形成稠合5,6或7员环, 其可含有至多2个选自O,S,N及P之杂原子; R6,R7,R8,R9,R10,R11,R12及R13分别为氢原子或(C1-C6)烷基; 及 X及Y分别为氢原子,卤原子,氰基,硫氰基,异硫氰基 或(C1-C6)烷基磺醯氧基,但X及Y非皆为氢原子;或 其光学对映异构物。2.如申请专利范围第1项之方 法,该方法使用具结构式(II)之苯甲酸醯胺,其中 R1为甲基; R2为甲基或乙基; R3及R5分别为氢原子,卤原子,甲基,硝基,氰基,-NR6R7, -CR8=NOR9或-NHCOOR10,但R3及R5非皆为氢原子; R4为氢原子,卤原子,-NR6R7,氰基,-CR8=NOR9,-NHCOOR10,-COOR 13或(C1-C4)烷基; R6,R7,R8,R9,R10及R13分别为氢原子或(C1-C6)烷基; X为氯;及 Y为氢原子;或 其光学对映异构物。3.如申请专利范围第1项之方 法,其中哺乳类细胞、细胞萃出物或微管蛋白系使 用于分析中,且其中 R1为甲基; R2为乙基; R3为卤原子或氰基; R4及R5为胺基或-CH=NOCH3但R4及R5不相同; X为氯;及 Y为氢原子;或 其光学对映异构物。4.如申请专利范围第1项之方 法,其中真菌细胞、细胞萃出物或微管蛋白系使用 于分析中,其中该真菌属于子囊菌纲(Ascomycete),半 分生孢子菌纲(Deuteromycete)或担子菌纲(Basidiomycetc) 真菌,及其中 R1为甲基, R2为甲基或乙基, R3为-CH=NOCH3, R4为氢原子,卤原子,胺基,氧基或甲基, R5为卤原子,甲基,硝基或氰基, X为氯及 Y为氢原子;或 其光学对映异构物。5.如申请专利范围第1项之方 法,其中真菌细胞、细胞萃出物或微蛋白系使用于 分析中,其中该真菌属于卵菌纲(Oomycete)真菌,及其 中 R1为甲基; R2为乙基; R3及R5分别为氢原子,卤原子,甲基,硝基,氰基,-NR6-R7 ,-CR8=NOR9或-NHCOOR10,但R3及R5非皆为氢原子; R4为氢原子,卤原子,-NR6R7,氧基,-CR8=NOR9,-NHCOOR10,-COOR 13式(C1-C4)烷基; R6,R7,R8,R9,R10及R13分别为氢原子或甲基; X为氯;及 Y为氢原子;或 其光学对映异构物。6.如申请专利范围第1项之方 法,其中植物细胞、细胞萃出物或微管蛋白系使用 于分析中,及其中 R1为甲基; R2为甲基或乙基; R3及R5分别为氢原子,卤原子,甲基,硝基或氰基;但R3 及R5非皆为氢原子; R4为氢原子, X为氯;及 Y为氢原子;或 其光学对映异构物。图式简单说明: 图1显示以14C标记化合物处理辣椒疫霉后藉硫酸十 二酯钠聚丙烯醯胺凝胶电泳和自动放射性摄影术 分析放射性标记蛋白质。 图2显示以14C标记化合物处理悬浮培养菸草细胞后 藉硫酸十二酯钠聚丙烯醯胺凝胶电泳和自动放射 性摄影术分析放射性标记蛋白质。 图3显示以14C标记化合物处理离体牛微管蛋白后藉 硫酸十二酯钠聚丙烯醯胺凝胶电泳和自动放射性 摄影术分析放射性标记蛋白质。