Non-radioactive, single-stranded labelled probe, method for its production and method of detecting a target nucleotide sequence using this probe.

摘要

L'invention concerne une nouvelle sonde de détection d'une séquence nucléique déterminée. Elle consiste dans un ADN recombinant contenant un insérat complémentaire de la séquence nucléique à détecter et des séquences nucléiques dérivées de l'ADN (+) du phage M13, les bases entrant dans la composition de cet ADN recombinant, notamment les groupes thymine étant remplacés par des groupes 5-bromo-uracile. L'invention concerne également un procédé pour la fabrication de cette sonde, ce procédé comprenant la culture d'hôtes cellulaires, plus particulièrement E. coli, auxotrophes pour la thymine, dans un milieu contenant une teneur limitante en thymine et du 5-bromo-uracile. Après le temps d'incubation requis, on élimine le surnageant et on récupère la sonde à partir des cellules bactériennes.