一种经紫外线和钴60γ-射线照射并经早熟选育获得的鸡球虫病疫苗的制备方法

摘要

一种经紫外线和钴60γ-射线照射并经早熟选育获得的鸡球虫病疫苗的制备方法，它的制备方法是：取样；增殖卵囊；利用紫外线和钴60γ-射线照射子代卵囊；紫外线和钴60γ-射线照射剂量的确定；获得七种艾美尔球虫(柔嫩艾美尔球虫、堆形艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫、布氏艾美尔球虫、和缓艾美尔球虫、早熟艾美尔球虫)早熟株卵囊；以第3步中紫外线和钴60γ-射线处理后的球虫卵囊为亲本，进行鸡球虫早熟选育；混合。它能大大缩短早熟选育所用时间，提高选育的效率，短时间内即可获得大量的商品化早熟致弱虫株。

主权项

1、一种经紫外线和钴60γ-射线照射并经早熟选育获得的鸡球虫病疫苗的制备方法，其特征在于它的制备方法是：(一)、取样：在偏远山区散养鸡中采集七种鸡艾美尔球虫(柔嫩艾美尔球虫、堆形艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫、布氏艾美尔球虫、和缓艾美尔球虫、早熟艾美尔球虫)样品；(二)、增殖卵囊：利用单卵囊分离技术得到七种艾美尔球虫(柔嫩艾美尔球虫、堆形艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫、布氏艾美尔球虫、和缓艾美尔球虫、早熟艾美尔球虫)的纯化卵囊，分别接种生长在无球虫环境下的雏鸡，收集子代卵囊；(三)、利用紫外线和钴60γ-射线照射子代卵囊：一种方法是：将七种艾美尔球虫(柔嫩艾美尔球虫、堆形艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫、布氏艾美尔球虫、和缓艾美尔球虫、早熟艾美尔球虫)的子代卵囊置于254nm紫外线下照射；另一种方法是：将七种艾美尔球虫的子代卵囊置于钴60γ-射线下照射；第三种方法是：将七种艾美尔球虫的子代卵囊先置于钴60γ-射线下照射，然后再置于254nm紫外线下照射；第四种方法是：先将卵囊置于254nm紫外线下照射，然后再置于钴60γ-射线下照射。最后将经各种方法处理后的卵囊放在2.5％重铬酸钾溶液中，放入28℃恒温箱中，培养48小时；(四)、紫外线和钴60γ-射线照射剂量的确定：以紫外线和钴60γ-射线照射后1-60％的球虫卵囊存活为基本适宜的照射剂量；以1-20％的球虫卵囊存活为适宜的照射剂量；以1-10％的球虫卵囊存活为较适宜的照射剂量；以1-5％的球虫卵囊存活为非常适宜照射剂量，以1-3％的球虫卵囊存活为最适宜的照射剂量；以1-2％的球虫卵囊存活为最佳的照射剂量；(五)、获得七种艾美尔球虫(柔嫩艾美尔球虫、堆形艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫、布氏艾美尔球虫、和缓艾美尔球虫、早熟艾美尔球虫)早熟株卵囊：以第3步中紫外线和钴60γ-射线处理后的球虫卵囊为亲本，根据鸡球虫早熟选育致弱的原理，选育出柔嫩艾美尔球虫、堆形艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫的早熟株；(六)、以第3步中紫外线和钴60γ-射线处理后的球虫卵囊为亲本，进行鸡球虫早熟选育，若无法获得七种艾美尔球虫(柔嫩艾美尔球虫、堆形艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫、布氏艾美尔球虫、和缓艾美尔球虫、早熟艾美尔球虫)的早熟株，可以重复第3步中的方法，然后再进行各虫种的早熟选育，如此反复，直到获得七种鸡艾美尔球虫的早熟株；(七)、混合，将上述四种(柔嫩艾美尔球虫、堆形艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫)致弱的鸡艾美尔球虫的孢子化卵囊按比例混合即得到鸡球虫病四价(柔嫩艾美尔球虫、堆形艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫)活疫苗。