Process for the preparation of bacterial clones containing an optimal genetic information for the protection of the growth hormone releasing factor in Escherichia Coli.

摘要

Procédé de préparation de clones bactériens portant une information génétique optimalisée pour la production de GRF humain dans E. coli, caractérisé en ce qu'on sélectionne parmi l'ensemble des séquences d'ADN potentiellement codantes pour le GRF une séquence considérée comme optimale pour l'expression du GRF dans E. coli, on découpe cette séquence en fragments simple brin de façon optimale compte tenu des possibilités de synthèse chimique d'ADN et des exigences de spécificité des hybrides à former entre ces fragments d'ADN, on synthétise chimiquement les fragments dont l'ensemble couvre l'ADN-GRF, on hybride et on ligue in vitro ces fragments entre eux pour obtenir l'ADN-GRF, on insère l'ADN-GRF obtenu dans un vecteur plasmidique, on transforme des bactéries hôtes Escherichia coli par l'ADN hybride obtenu dans la phase précédente, on sélectionne parmi ces bactéries transformées celles qui portent un plasmide de manière à obtenir une banque de clones, on isole de cette banque les clones porteurs de l'ADN-GRF par crible caractéristique de l'ADN-GRF, et on caractérise l'ADN-GRF par séquençage.