体外再生丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白酶的解蛋白活性的方法

摘要

这是一种体外再生与HCV NS3蛋白质相关的丝氨酸蛋白酶活性的方法，包括对NS3中所含序列和NS4A中所含序列的利用。该方法利用HCV NS4A蛋白质或其中所含的序列作为丝氨酸蛋白酶活性或普遍而言与NS3相关的酶活性的辅助因子的能力。当NS4A与NS3的摩尔比至少为1∶1时获得丝氨酸蛋白酶的最佳活性。NS3与NS4A还可以作为NS3-NS4A前体掺入反应混合物，因为通过自蛋白水解反应，该前体会产生等摩尔量的NS3和NS4A。也有可能使前体中的NS3与NS4A之间的切割位点发生突变，这样NS4A仍以共价键形式与NS3相结合。可随后从所述非解蛋白前体中除去不影响NS3解蛋白活性的序列。本发明还涉及一种包含NS3和NS4A中所含序列的组合物以及利用这些组合物建立为了治疗目的能选择可抑制与NS3相关的酶活性的化合物的酶促试验。附图表示在本方法中用于激活培养细胞中和体外的HCV NS3蛋白酶的质粒载体。

主权项

1.一种体外再生HCV NS3蛋白酶的解蛋白活性的方法，其特征在于将NS3和NS4A中所含的序列都用于反应混合物中。