一种猪皮本体高效纯化的方法

摘要

本发明公开了一种猪皮本体高效纯化的方法，该纯化方法是选用健康的新鲜猪皮为原料，在维持猪皮的三维构造不变的前提下，对猪皮进行反复清洗和多种酶制剂－碱性材料交替处理，除去猪皮中的非胶原成分和小分子物质，得到具有良好生物相容性和生物活性的纯化猪皮。这种纯化猪皮用于提取制备医用胶原蛋白、制备组织工程支架材料和修复与重建材料。

主权项

1.一种猪皮本体高效纯化的方法，其特征在于该纯化方法含有以下步骤：(1)清洗：选取健康的新鲜猪皮100重量份装入转鼓中，加水调节液比2.0-4.0，转动60-180min，控干废液，再加水调节液比2.0-4.0，加入氯化钠1.0-8.0重量份，转动60-180min，控干废液，然后充分水洗；(2)脱脂：清洗完毕，加入40-45℃的热水调节液比1.0-4.0，鼓内温度为32-38℃，加入平平加0.1-1.0重量份，纯碱0.5-2.0重量份，渗透剂JFC 0.1-0.6重量份，转动60-120min，控干废液，加入温度为28-38℃的热水，使液比达到2.0-5.0，转动60-120min，控干废液，再加入28-38℃的热水，使液比达到2.0-5.0，转动60-150min，控干废液，加入40-45℃的热水调节液比2.0-5.0，鼓内温度为32-38℃，加入平平加0.3-0.8重量份，脱脂剂9088 2.0-5.0重量份，渗透剂JFC 0.2-0.8重量份，洗衣粉2.0-4.0重量份，2.1203脂肪酶0.3-0.6重量份，转动60-150min，控干废液，加入温度为30-35℃的热水，使液比达到3.0-5.0，转动60-150min，控干废液，再加入30-35℃的热水，使液比达到4.0-6.0，转动60-150min，控干废液；(3)浸酶：加入40-45℃的热水调节液比0.5-1.2，鼓内温度为32-40℃，加入5万单位的166中性蛋白酶0.8-4.0重量份，5万单位的AS1.398蛋白酶0.3-2.0重量份，硫酸铵0.2-0.8重量份，平平加0.3-0.8重量份，间歇转动3min/30min，共转动3-10次，总时间90-300min，然后，控干废液，加入氯化钠3.0-8.0重量份，转动30-90min，将皮出鼓，在温度为25-32℃的温室内整齐堆置，堆置总时间24-72h；(4)去毛、清洗：采用机器对猪皮进行去毛后，将猪皮装入转鼓中，加水调节液比2.0-5.0，转动60-180min，控干废液，加水至液比为2.0-5.0，转动60-180min，控干废液，反复操作3次，加入氯化钠2.0-5.0重量份，加水调节液比为2.0-5.0，转动60-180min，控干废液，加水调节液比为2.0-5.0，转动60-180min，控干废液，反复操作3次，然后，充分水洗，控干废液；(5)膨胀：去毛、清洗后，加水调节液比1.5-4.0，加入30wt％的液碱3.0-6.0重量份，渗透剂JFC 0.3-0.8重量份，转动90-180min，流水洗30min；(6)脱碱、酶消化：加入40-45℃的热水调节液比1.5-2.0，鼓内温度为30-32℃，加入硫酸0.1-0.3重量份，氯化铵或硫酸铵1.5-3.0重量份，平平加0.2-0.6重量份，转动90-180min，再加入5万单位的AS1.398中性蛋白酶0.1-0.8重量份、活力为1∶25的工业胰酶0.1-0.6重量份，转动120-240min，控干废液；(7)清洗：加水调节液比2.0-5.0，加入氯化钠2.0-5.0重量份，转动90-180min，控干废液，加水调节液比2.0-5.0，转动90-180min，控干废液，按上述方法重复操作3次，然后，充分水洗，控干废液，获得纯化猪皮；(8)滚盐：加入氯化钠3.0-12.0重量份，转动30-90min，出鼓；(9)分割：首先将纯化猪皮裁成矩形，然后再分割成10.0-30.0cm×10.0-30.0cm的小块矩形；(10)装袋、冷冻保存：将装袋的纯化猪皮放入冻库，在温度-5--15℃的条件下冷冻保存。