一种纳米纤维生物膜固定化双酶系统及其催化合成海藻糖的方法

摘要

本发明提供了一种纳米纤维生物膜固定化双酶系统及其催化合成海藻糖的方法。本方法在发酵产耐高温海藻糖合酶的大肠杆菌细胞表面自组装淀粉质纳米纤维生物膜，利用可基因编码的多肽标签SpyTag‑SpyCatcher特异性共价结合高效固定重组β淀粉酶，自主构建海藻糖合酶—β淀粉酶双酶催化体系，最终使胞外、胞内两步催化连续进行。本方法对β淀粉酶的固定化效率可达到50%‑62%；含量为20%‑25%重量的可溶性淀粉在胞外经生物膜上的β‑淀粉酶催化形成麦芽糖后进入细胞内与海藻糖合成酶反应生成海藻糖，固定化细胞重复利用10‑16次后淀粉的转化率可达到45%‑55%。

主权项

一种纳米纤维生物膜固定化双酶系统，其特征在于，该双酶系统可在同一体系中催化淀粉生成海藻糖，其中，该双酶分别为β‑淀粉酶与海藻糖合成酶。