摘要 |
<p>Plasmides utilisés comme vecteurs de clonage portant un promoteur réglable qui a été inséré de telle façon que la transcription du promoteur règle la réplication si bien qu"une amélioration de la transcription a pour conséquence un nombre de duplications du plasmide sensiblement accru ou non contrôlé lorsque les micro-organismes hôtes contenant le plasmide sont cultivés sous des conditions assurant une telle amélioration de transcription. On choisit de préférence le promoteur réglable lambdaPR, dont l"activité est contrôlée par un répresseur lambdacl sensible à la température. Pour obtenir les produits génétiques des plasmides, on cultive les micro-organismes hôtes dans lesquels ont été transformés lesdits plasmides à environ 30o C afin de garantir un nombre de duplication du plasmide constant et faible lors des étapes d"ensemencement et de multiplication du micro-organisme, après quoi on amène la température à environ 36-42o C pour obtenir un nombre de duplication du plasmide non contrôlé et une quantité accrue de produits génétiques. On récolte ensuite le produit génétique dans la culture. </p> |