| 主权项 |
1﹒用于自细菌中不溶凝聚物回收具生物活性 之人类间白血球素-4分子之方法,该方 法包含下列步骤: 瓦解细菌之细胞膜; 自瓦解物分离不溶性凝聚物; 以含向乱性剂与迁原剂之第一水溶液 溶解不溶性凝聚物而形成已还原与变性之 人类间白血球素-4; 以含还原剂之第二水溶液稀释第一水 溶液中已还原与变性之人类间白血球素- 4之浓度而降低同一间白血球素分子不同 部份间之交互作用; 降低向乱性剂之浓度以及还原剂之浓 度以使已还原与变性之人类间白血球素恢 复与氧化形成具生物活性之人类间白血球 素-4;以及 纯化具生物活性之人类间白血球素- 4。 2﹒根据上述申请专利范围第1 之方法,其 中该向乱性剂系脉HCI。 3﹒根据上述申请专利范围第1项之方法,其 中该还原剂所含之硫醇还原剂系麸胺基硫 或二硫苏糖醇。 4﹒根据上述申请专利范围第3项之方法,其 中该还原剂包含1-3mM还原态之麸胺 硫基与0.1-0.6mM氧化态之麸胺硫基。 5﹒根据上述申请专利范围第2,3或4项之 方法,其中该溶解步骤包括该不溶性凝聚 物于上述第一水溶液中形成浓度小于约2 .5mg/ml之溶液。 6﹒根据上述申请专利范围第2,3或4项之 方法,其中以第二水溶液稀释之上述步骤 造成已还原与变性人类间白血球素-4分 子分子间平均距离增加1.5-3.0倍。 7﹒根据上述申请专利范围第6项之方法,其 中该第二水溶液含浓度在约50至约200m M或更高之盐类。 8﹒根据上述申请专利范围第7项之方法,其 中向乱性剂与还原剂之浓度在以第二水溶 液稀释后,复藉透析降低达一干倍。 9﹒根据上述申请专利范围第7项之方法,其 中该纯化步骤藉凝胶过滤层析法完成。 10﹒根摅上述申请专利范围第1项之方法, 其中该纯化步骤产生具比活性至少5x10 单位/mh之入类间白血球素-4。图式简单说明: 图1系带人类IL-4CDNA插入物之大 肠杆菌表现媒体TRPCII图示。 图2图示已再褶叠人类IL-4之凝胶 迥滤溶离图。 图3显示在各种变性方法及用凝胶电泳 法分离后L-4蛋白质之西方氏吸渍。 |
