高速逆流色谱分离纯化莲子心中黄酮苷类化合物的方法

摘要

本发明提供一种分离纯化莲子心中黄酮苷类化合物的方法，所述方法包括以下步骤：(1)莲子心溶液的制备(2)莲子心总黄酮的富集(3)高速逆流色谱分离纯化，得到槲皮素‑3‑O‑β‑D‑葡萄糖苷、异鼠李素‑3‑O‑β‑D‑葡萄糖苷、芹菜素‑6‑C‑β‑D‑木糖基‑8‑C‑β‑D‑葡萄糖苷和芹菜素‑6‑C‑β‑D‑葡萄糖基‑8‑C‑β‑D‑葡萄糖苷。本发明分离纯化黄酮苷类化合物单体纯度高、损失少、操作简单、制备量大、经济环保。

主权项

一种高速逆流色谱分离纯化莲子心中黄酮苷类化合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)莲子心溶液的制备将莲子心阴干、粉碎，以浓度为50％～90％的乙醇为溶剂进行超声提取1～3次，超声提取的固液比为1：10～1:30，提取时间为1～4h，之后过滤，合并滤液进行真空减压浓缩除去溶剂，得莲子心乙醇提取液；(2)莲子心总黄酮的富集所述莲子心乙醇提液经大孔树脂、聚酰胺、硅胶、反向硅胶或凝胶吸附，用水和乙醇的混合溶剂梯度洗脱，收集含有黄酮成分的洗脱液，合并减压回收溶剂，冷冻干燥得莲子心粗黄酮；(3)高速逆流色谱分离纯化采用体积比为1:1:1～1:5:10的乙酸乙酯‑正丁醇‑水溶液为溶剂体系，按将固定相以10～20mL/min流速注入高速逆流色谱仪，待所述固定相充满整个柱子后，以1～3mL/min的流速注入流动相，调节逆流色谱仪转速至700～900rpm；待两相溶剂体系在逆流柱中达到动态平衡时，将所述莲子心粗黄酮溶于所述两相溶剂体系，进样浓度为10mg/mL～50mg/mL，进样体积为20mL～50mL，进行高速逆流色谱分离；在所述高速逆流色谱分离时，以波长200～350nm的紫外检测器检测，分别收集不同馏分减压浓缩冷冻干燥，得到槲皮素‑3‑O‑β‑D‑葡萄糖苷、异鼠李素‑3‑O‑β‑D‑葡萄糖苷、芹菜素‑6‑C‑β‑D‑木糖基‑8‑C‑β‑D‑葡萄糖苷和芹菜素‑6‑C‑β‑D‑葡萄糖基‑8‑C‑β‑D‑葡萄糖苷。