检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法

摘要

本发明检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法，包括步骤：1)胶乳微球的活化；2)胶乳微球与抗CD58单克隆和多克隆IgG抗体交联；3)交联体的洗涤；4)交联体的保存。本发明制备的检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体，能与异常糖基化修饰CD58蛋白发生特异性结合反应，而不与正常表达的CD58蛋白和非CD58蛋白发生非特异性反应；用于胶乳免疫比浊法检测外周血或血清异常糖基化修饰CD58分子水平，定量分析样品中异常糖基化修饰CD58含量。

主权项

检测可溶性异常糖基化修饰CD58分子的胶乳微球交联特异性单克隆或多克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)胶乳微球的活化：取胶乳微球于胶乳活化缓冲液中，采用超声波进行乳化活化后，脱盐并去除残留活化物，完成活化；胶乳活化缓冲液的配方为0.05‑0.5M pH5.5‑7.5的MES缓冲液、水、吐温‑20、19.2mg/mL NHS和52mM EDAC；所述0.05‑0.5M pH5.5‑7.5的MES缓冲液、水、吐温‑20、19.2mg/mL NHS和52mM EDAC的体积比为1:1.5:0.01‑0.015:0.5‑1.5:2‑4；2)胶乳微球与抗CD58单克隆或多克隆IgG抗体交联：于垂直混合仪中加入活化后的胶乳微球和抗异常糖基化修饰CD58分子单克隆/多克隆IgG抗体，混匀并反应后，加入甘氨酸缓冲液混合均匀，得到交联体；3)交联体的洗涤：将交联体离心后取沉淀，用洗涤液重悬沉淀后离心取沉淀，重复3‑5次，完成洗涤；4)交联体的保存：将洗涤后的交联体沉淀于甘氨酸保存液中超声混匀，4℃保存。