发明名称 一种利用酶法转化生产L‑正缬氨酸的方法
摘要 通过大肠杆菌和钝齿棒杆菌之间的穿梭质粒pXMJ19,将来源于Trigonopsis variabilis的D‑氨基酸氧化酶成功在C.glutamicum ATCC13032中表达。通过构建重组质粒pET‑28a(+)‑leudh和pET‑28a(+)‑fdh,将来源于Bacillus cereus和Candida boidinii的亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶成功在E.coli BL21中表达。以上述三株工程菌的粗酶液作为生物催化剂,以混合型DL‑正缬氨酸作为底物,同时确定了最佳的反应温度为30℃和pH为7.5。在最佳的转化条件下进行酶法动力学拆分生产L‑正缬氨酸。25h后转化液中的L‑正缬氨酸的含量为80.09g/L,L‑正缬氨酸产率为98.3%。本发明方法生产L‑正缬氨酸具有效率高,绿色环保,产品纯度高等优点。
申请公布号 CN106520651A 申请公布日期 2017.03.22
申请号 CN201610979842.5 申请日期 2016.11.08
申请人 江南大学 发明人 饶志明;戚云龙;杨套伟;周俊平;郑俊贤;徐美娟;张显
分类号 C12N1/21(2006.01)I;C12N9/06(2006.01)I;C12N9/02(2006.01)I;C12P13/08(2006.01)I;C12R1/15(2006.01)N;C12R1/19(2006.01)N 主分类号 C12N1/21(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种具有D‑氨基酸氧化酶活性的谷氨酸棒杆菌重组菌,其特征在于,将Trigonopsis variabilis来源的D‑氨基酸氧化酶基因克隆至Corynebacterium glutamicum ATCC13032中获得的。
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