发明名称 |
一种利用酶法转化生产L‑正缬氨酸的方法 |
摘要 |
通过大肠杆菌和钝齿棒杆菌之间的穿梭质粒pXMJ19,将来源于Trigonopsis variabilis的D‑氨基酸氧化酶成功在C.glutamicum ATCC13032中表达。通过构建重组质粒pET‑28a(+)‑leudh和pET‑28a(+)‑fdh,将来源于Bacillus cereus和Candida boidinii的亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶成功在E.coli BL21中表达。以上述三株工程菌的粗酶液作为生物催化剂,以混合型DL‑正缬氨酸作为底物,同时确定了最佳的反应温度为30℃和pH为7.5。在最佳的转化条件下进行酶法动力学拆分生产L‑正缬氨酸。25h后转化液中的L‑正缬氨酸的含量为80.09g/L,L‑正缬氨酸产率为98.3%。本发明方法生产L‑正缬氨酸具有效率高,绿色环保,产品纯度高等优点。 |
申请公布号 |
CN106520651A |
申请公布日期 |
2017.03.22 |
申请号 |
CN201610979842.5 |
申请日期 |
2016.11.08 |
申请人 |
江南大学 |
发明人 |
饶志明;戚云龙;杨套伟;周俊平;郑俊贤;徐美娟;张显 |
分类号 |
C12N1/21(2006.01)I;C12N9/06(2006.01)I;C12N9/02(2006.01)I;C12P13/08(2006.01)I;C12R1/15(2006.01)N;C12R1/19(2006.01)N |
主分类号 |
C12N1/21(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种具有D‑氨基酸氧化酶活性的谷氨酸棒杆菌重组菌,其特征在于,将Trigonopsis variabilis来源的D‑氨基酸氧化酶基因克隆至Corynebacterium glutamicum ATCC13032中获得的。 |
地址 |
214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号 |