一种快速准确的检测CYP2D6基因拷贝数变异的方法

摘要

本发明公开了一种快速准确的检测CYP2D6基因拷贝数变异的方法：(1)制备检测CYP2D6基因多态性的引物；(2)制备RPP30基因引物和探针；(3)荧光定量PCR反应：采用单管二重定量PCR的方法检测检测CYP2D6基因的拷贝数变异；(4)取CYP2D6基因为单拷贝的样品作为对照样品。检测对象和对照样品各进行4个重复的PCR反应，获取实时定量PCR扩增的Ct值；(5)荧光定量PCR结果分析。本发明实时定量荧光PCR检测方法没有PCR后处理，能够大量节省时间与人力。从DNA提取到荧光PCR实验结束，及数据分析，全部过程仅需4小时，实体实验操作时间小于2小时。

主权项

一组检测CYP2D6基因多态性的引物，其特征在于：包括CYP2D6基因3个区段的PCR扩增引物和荧光探针，CYP2D6基因对应探针用FAM进行5’端标记；所述CYP2D6基因的3组引物和探针序列如下：所述RPP30基因引物和探针分别为：RPP30‑P‑F             5’‑AGATTTGGACCTGCGAGCG‑3’RPP30‑P‑R             5’‑GAGCGGCTGTCTCCACAAGT‑3’RPP30‑P               5’HEX‑TTCTGACCTGAAGGCTCT‑3'BHQ‑1。