HPPD变体和使用方法

摘要

在本发明中，描述了显示针对若干类别的HPPD‑抑制剂的完全耐受性的HPPD酶和含有这些酶的植物。已设计一组不具有与HPPD抑制剂的亲和力或仅具有显著减小的亲和力的HPPD酶，并且同时HPPD抑制剂与该酶的解离速率增加至一定程度，以使得这些HPPD抑制剂不再用作缓慢结合或缓慢且紧密结合的抑制剂，而是与此相反地变成完全可逆的抑制剂。具体地说，提供了编码HPPD抑制剂耐受性多肽的分离多核苷酸。另外，包括与这些多肽相对应的氨基酸序列。

主权项

一种重组核酸分子，编码由氨基酸序列组成的4‑羟苯丙酮酸二加氧酶(HPPD)蛋白，该氨基酸序列包含在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置335相对应的氨基酸位置处的脯氨酸和在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置336相对应的位置处的苯丙氨酸或酪氨酸，并且其中所述HPPD蛋白对HPPD抑制剂除草剂耐受，其中所述编码的HPPD蛋白由进一步包含以下各项的氨基酸序列组成：(a)在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置188相对应的氨基酸位置处的丙氨酸、在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置226相对应的氨基酸位置处的组氨酸、以及在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置340相对应的位置处的甘氨酸；(b)在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置200相对应的氨基酸位置处的异亮氨酸、在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置226相对应的氨基酸位置处的组氨酸、以及在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置340相对应的位置处的甘氨酸；(c)在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置226相对应的氨基酸位置处的组氨酸、以及在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置340相对应的位置处的甘氨酸；(d)在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置172相对应的氨基酸位置处的甘氨酸、以及在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置340相对应的位置处的甘氨酸；(e)在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置200相对应的氨基酸位置处的异亮氨酸、以及在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置340相对应的位置处的甘氨酸；或者(f)在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置188相对应的氨基酸位置处的丙氨酸、在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置200相对应的氨基酸位置处的异亮氨酸、在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置226相对应的氨基酸位置处的组氨酸、以及在与SEQ ID NO:1的氨基酸位置340相对应的位置处的甘氨酸。