使用改进孟加拉红培养基检测水稻种子携带真菌的方法

摘要

本发明公开一种使用改进孟加拉红培养基检测水稻种子携带真菌的方法。该方法用改进孟加拉红培养基培养检测水稻种子，其培养是将培养皿放入培养箱中，25℃，光照强度为9000Lx，光照12h/黑暗12h条件下培养1d，待种子吸涨后，再置于‑20℃冰箱中保持12h，取出培养皿在28℃恒温，光照强度为9000Lx，光周期为12h光期/12h暗期，培养6d，挑取真菌，显微镜下观察检查种子携带的真菌种类。所述改进孟加拉红培养基增加了硫酸铜，硝酸锌，尸胺，减少了硫酸镁用量。本发明方法有利于不同种类真菌的生长，可多检测分离到真菌种类，操作不易被细菌污染，真菌菌落直径较小，便于真菌的分离和统计。

主权项

使用改进孟加拉红培养基检测水稻种子携带真菌的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)改进孟加拉红培养基的配制，按改进孟加拉红培养基配方称取各成分置于三角瓶中，再加入水1L，按湿热灭菌法，在121℃，0.1～0.15MPa，湿热灭菌20min，分装入9cm直径培养皿内备用；所述改进孟加拉红培养基的配方为：每升灭菌水中加入蛋白胨5g，葡萄糖10g，磷酸二氢钾1g，MgSO₄·7H₂O 0.25g，琼脂15g，孟加拉红0.033g，氯霉素0.1g，硫酸铜0.05g，硝酸锌0.029g，尸胺0.0001g；(2)待培养皿内的改进孟加拉红培养基凝固后，将种子用质量分数为5％的次氯酸钠溶液进行表面消毒8分钟，然后将种子均匀放置在培养皿内的培养基上，每个培养皿放置10粒种子，然后将培养皿放入光照培养箱中，25℃，光照强度为9000Lx，光照12h/黑暗12h条件下培养1d，待种子吸涨后，再置于‑20℃冰箱中保持12h，然后取出培养皿在28℃恒温，光照强度为9000Lx，光周期为12h光期/12h暗期，培养6d，再挑取真菌，在显微镜下观察形态特征，检查种子携带的真菌种类。