| 发明名称 | 一种3-磷酸甘油酰基转移酶基因的筛选和鉴定方法 | ||
| 摘要 | 本发明一种3-磷酸甘油酰基转移酶基因的筛选和鉴定方法，构建条件型致死酵母双突变体ZAFU1(BY4742，gat1△gat2△+[pGAL1::AtGPAT1LEU2])和ZAFU2(BY4742，gat1△gat2△+[pGAL1::AtGPAT5LEU2])，建立快速和高效的体内遗传互补筛选体系，应用于真核生物中含有或不含有酰基转移酶特征序列的GAPTs基因的筛选；同时，也可应用于医学上抗肥胖病的药物筛选。 | ||
| 申请公布号 | CN106319022A | 申请公布日期 | 2017.01.11 |
| 申请号 | CN201510385112.8 | 申请日期 | 2015.07.03 |
| 申请人 | 浙江农林大学 | 发明人 | 郑志富;韩秀秀;刘宏波;苗迎春;雷洁 |
| 分类号 | C12Q1/04(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I | 主分类号 | C12Q1/04(2006.01)I |
| 代理机构 | 浙江英普律师事务所 33238 | 代理人 | 陈俊志 |
| 主权项 | 一种3‑磷酸甘油酰基转移酶(GPATs)基因的筛选和鉴定方法，其特征在于包括如下步骤：步骤一、构建中间型酵母双突变体：将带有异源GPATs基因的表达载体通过酵母遗传转化手段，引入到带有酵母自身GAT1或GAT2基因(编码GPATs)的表达载体的酵母双突变体，获得含有分别带有酵母GAT1(或GAT2)基因和一个异源GPAT基因的两个表达载体的中间型酵母双突变体；步骤二、将步骤一所获得的中间型酵母双突变体经含有尿嘧啶(URA)液体培养基摇菌过夜，然后在含有5‑氟乳清酸(5‑FOA)和URA的固体培养基上进行筛选，得到新的含有一个异源GPAT基因的表达载体的条件型致死酵母双突变体；步骤三、利用改造后的pYES2‑yADH1‑Kan新型质粒构建候选GPATs基因表达载体，导入到新的条件型致死酵母双突变体。步骤四、采用含有葡萄糖的培养基作为筛选条件，能使新的条件型致死酵母双突变体在葡萄糖培养基中恢复生长的异源基因，即为编码具有GPAT酶活性的基因。 | ||
| 地址 | 311300 浙江省杭州市临安市环城北路88号 | ||