Alport综合征患者诱导性多能干细胞的差异表达蛋白及分析方法和应用

摘要

本发明涉及一种可用于AS的发病机理研究的Alport综合征患者诱导性多能干细胞的差异表达蛋白及分析方法和应用。通过采用iTRAQ技术联合液相串联质谱技术分析Alport综合征患者诱导性多能干细胞(iPSCs)和正常人的iPSCs之间的差异表达蛋白，筛选早期诊断Alport综合征的生物标记物及可能的治疗靶点。由于Alport综合征为一种多器官并发性综合病征，分析得到的差异表达蛋白可以为诊断Alport综合征提供中间结果信息，为进一步研究Alport综合征的发病机制及潜在的治疗靶点提供技术支持。

主权项

一种Alport综合征患者诱导性多能干细胞的差异表达蛋白的分析方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，分别提取Alport综合征患者诱导性多能干细胞和健康人的诱导性多能干细胞的总蛋白，得到两组蛋白样本；步骤二，分别对两组所述蛋白样本进行还原烷基化处理，得到两组蛋白样本溶液；步骤三，分别向两组蛋白样本溶液中加入胰蛋白酶进行酶解处理；步骤四，使用不同的标记试剂，分别对酶解处理后的两组样本进行iTRAQ标记处理，并将标记处理后的Alport综合征患者组与健康人的样本溶液混合；步骤五，对混合后的样本进行强阳离子交换分离处理；步骤六，对强阳离子交换分离处理后的样本进行液相色谱分离，再将液相色谱分离的肽段进行串联质谱分析；步骤七，使用蛋白质鉴定软件对质谱分析结果进行蛋白质鉴定，根据蛋白质丰度水平，分析得到Alport综合征患者与健康人的诱导性多能干细胞的差异表达蛋白。