一种通过浸泡法诱导无籽刺梨四倍体产生的方法

摘要

本发明公开了一种通过浸泡法诱导无籽刺梨四倍体产生的方法，包括如下步骤：步骤一：材料准备,无菌苗茎段去除叶片和顶端，截成0.8‑3cm长，每段至少保留一个叶腋；步骤二：预培养：培养基MS+0.5mg/L 6‑BA中预培养，2‑3d；步骤三：避光震荡：将预处理后的材料，浸泡于含200‑500mg/L秋水仙素的无菌水中，于摇床上以120r/min，25‑30℃避光震荡，处理时间分别12‑72h；步骤四：光照培养：材料经浸泡处理后，转入未附加秋水仙素的MS+ 0.15mg/L NAA+ 0.5mg/L 6‑BA培养基中继续培养；步骤五：变异芽的同质化处理：上述培养40d后，选培养得到的变异明显的芽苗，在培养基MS+ 0.15mg/L NAA+ 0.5mg/L 6‑BA中，间隔40d反复培养5次。本发明的诱导方法,获得了四倍体无籽刺梨新种质，可增加无籽刺梨果实营养成分如Vc、VE和SOD等，同时使其果径和可食用部分增多。

主权项

一种通过浸泡法诱导无籽刺梨四倍体产生的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：材料准备,无菌苗茎段去除叶片和顶端，截成0.8‑3cm长，每段至少保留一个叶腋；步骤二：预培养：培养基MS+0.5mg/L 6‑BA中预培养，1‑3d；步骤三：避光震荡：将预处理后的材料，浸泡含200‑500mg/L秋水仙素的无菌水中，于摇床上以120r/min，25‑30℃避光震荡，处理时间分别12‑72h；步骤四：光照培养：材料经浸泡处理后，转入未附加秋水仙素的MS+ 0.15mg/L NAA+ 0.5mg/L 6‑BA培养基中继续培养；步骤五：变异芽的同质化处理：上述培养40d后，选培养得到的变明显的芽苗，在培养基MS+ 0.15mg/L NAA+ 0.5mg/L 6‑BA中，间隔40d反复培养5次；其中避光震荡结束后，需将茎段在超净工作台上，用无菌过滤纸吸尽表面残留液体，再进行步骤四。