一种超高压提取北虫草大米培养基中虫草素的方法

摘要

本发明涉及一种超高压提取北虫草大米培养基中虫草素的方法，属于天然产物技术领域。本发明的工艺流程包括对北虫草培养基进行切片、热风干燥、粉碎、超高压提取、离心、陶瓷膜除杂、浓缩、冷冻干燥，再采用高速逆流色谱纯化虫草素，最后通过高效液相色谱进行检测。采用本方法，北虫草培养基中虫草素的得率达到常规方法的1.2倍，纯度可达90%以上。本发明采用超高压提取虫草素具有高效低耗、提取率高、杂质含量低、稳定性好等优点，而且整个提取过程不会产生高温，可有效保留虫草素活性成分及结构。本方法所制备的虫草素安全无污染，具有很高的食（药）用价值，为食用菌北虫草副产物的综合利用带来了一定的市场应用前景和经济效益。

主权项

一种超高压提取北虫草大米培养基中虫草素的方法，其特征在于具体步骤如下：（1）原料预处理：将相同批次北虫草大米培养基收集后切片，并于60℃热风干燥至含水率低于5%，粉碎过20‑120目筛；（2）超高压处理：将过筛后的培养基粉按料液比1:40‑70加入蒸馏水，单位为g/ml，真空脱气后放入超高压设备进行处理，压力300‑600MPa，处理条件为：温度为常温，处理时间9‑15min，处理后离心得提取液；（3）陶瓷膜分离：将提取液通过陶瓷膜除杂，得到透过液；所述的分离条件为：将处理液先通过150KD陶瓷膜，流速16‑30mL/min，压力0.20bar‑1.0bar，温度23℃‑30℃，保留透过液，再通过15KD陶瓷膜进行二次除杂，流速、压力和温度与第一次保持一致；（4）旋转浓缩：使用旋转蒸发仪对上述透过液在温度60℃下进行浓缩，浓缩至原来体积的百分之一，得到浓缩液；（5）冷冻干燥：将浓缩液放入冻干机中干燥，温度从‑3℃‑45℃，每隔2h均匀上调，时间24‑26h；（6）高速逆流色谱制备：取冻干样品于逆流色谱中制备虫草素，高速逆流色谱条件为：溶剂系统由乙酸乙酯、正丁醇、水组成，主机转速700‑900r/min，流速2.5‑4mL/min，分离温度15‑35℃，进样体积最大为20mL，所述溶剂系统中乙酸乙酯、正丁醇、水的体积比为1~2:3~4:5；（7）高效液相色谱测定：HPLC测定虫草素含量，色谱条件：色谱柱C₁₈柱，流动相是乙腈:水=5:95，流速1.0mL/min，柱温35℃，进样量10uL。