染色体着陆垫及相关用途

摘要

本发明提供了在宿主细胞中稳定整合和/或表达一种或多种重组多核苷酸的方法。所述重组多核苷酸通常被整合入宿主基因组中的一些天然染色体整合位点处。这些天然染色体整合位点位于CHO基因组的特定基因之内或附近，所述基因为锚蛋白2基因(Ank2)、切割和多腺苷酸化特异性因子4基因(Cpsf4)、C‑Mos基因和Nephrocystin‑1/Mal基因。还提供了将位点特异性重组序列(染色体着陆垫)插入到这些特定染色体位置的方法和核酸分子。进一步提供了含有整合入天然染色体整合位点的染色体着陆垫或转基因的工程化宿主细胞。进一步提供了用于在带有插入的染色体着陆垫的宿主细胞中整合和表达异源多核苷酸的方法和组合物。

主权项

在哺乳动物细胞中稳定整合并表达异源多核苷酸的体外方法，包括在天然染色体位点将所述异源多核苷酸插入到哺乳动物细胞基因组中，所述天然染色体位点位于以下位置或以下位置附近：i)中国仓鼠卵巢细胞中SEQ ID NO:2的位置629‑630，或其它哺乳动物细胞基因组中在切割和多腺苷酸化特异性因子4基因(Cpsf4)中对应于SEQ ID NO:2的位置629‑630的位置；ii)中国仓鼠卵巢细胞中SEQ ID NO:3的位置272‑273，或针对C‑Mos基因对应于SEQ ID NO:3的位置272‑273的位置；或者iii)中国仓鼠卵巢细胞中SEQ ID NO:4的位置239‑240，或在Nephrocystin‑1/Mal基因中对应于SEQ ID NO:4的位置239‑240的位置。