一种增强和抑制表达龙眼胚性愈伤组织中miRNA活性的方法

摘要

本发明提供了一种增强和抑制表达龙眼胚性愈伤组织中miRNA的方法。本发明根据miRNA成熟体经化学修饰和特殊标记设计的miRNA模拟物agomir和高效阻断剂antagomir，采用细胞转染剂Lipofectamine 2000 reagent将二者导入龙眼胚性愈伤组织细胞，实现在龙眼活体中特异性增强或抑制目标miRNA活性，同时进行miRNA表达体系优化和作用效果持续时间鉴定。该方法具有操作简单快速、干扰效果显著、稳定持久等优点，避免了现有方法依赖转基因技术因而实验周期长、费时费力等缺点，本发明为龙眼愈伤组织miRNA研究提供了一种高效便捷的方法，对miRNA表达调控和功能鉴定具有重要意义。

主权项

一种增强和抑制表达龙眼胚性愈伤组织中miRNA活性的方法，其特征在于：通过以下步骤实现：利用龙眼胚性愈伤组织悬浮细胞培养体系大量增殖并筛选松散且生长状态良好愈伤组织，采用小型培养容器分别加入胚性愈伤组织细胞、培养基、细胞转染剂和miRNA模拟物或miRNA高效阻断剂，实现特异增强或抑制目标miRNA在愈伤组织细胞中的表达活性。