一种集分离方法开发、在线分离-富集于一体的天然药物二维制备色谱仪及其工作方法

摘要

一种集分离方法开发、在线分离‑富集于一体的天然药物二维制备色谱仪及其工作方法，属于天然药物成分分离技术领域，应用于中药、植物药、海洋药物等的研发领域。该色谱仪包括控制系统、泵入系统、进样系统、检测系统、一维色谱柱系统、二维色谱柱系统和二位八通阀。在同一台仪器上实现分离方法开发与优化、天然药物的二维正交色谱分离制备。将复杂的天然产物分离成18个可重复获得的组分或有效部位，二维分离使其进一步分离得到单体化合物，全部的分离工作在计算机控制下工作，极大的提高了中药等天然药物系统性分离制备的效率，为中药、植物药、海洋药物有效部位、成分的制备分离、活性筛选提供了高效、可靠的平台。

主权项

一种集分离方法开发、在线分离‑富集于一体的天然药物二维制备色谱仪，它包括控制系统，其特征在于：它包括泵入系统、进样系统、检测系统、一维色谱柱系统、二维色谱柱系统和二位八通阀（12），所述二位八通阀（12）包括A口、B口、C口、D口、E口、F口、G口和H口；所述泵入系统包括第一泵（1）、第二泵（2）和混合器（4），混合器（4）连接有泵入系统输出管（4a）；所述进样系统包括进样系统输入管（5a）、二位六通进样阀（5）、进样系统输出管（5b）；所述检测系统包括依次设置的检测系统输入管（6a）、六通柱选择阀（6）的六通柱选择阀支管（6c）、检测仪（7）、三通混合器（8）和检测系统输出管（8a）；所述一维色谱柱分离系统采用连接在六通柱选择阀（6）的5个色谱柱（6b）之一作为分离柱、再依次连接一维色谱柱输入管（9a）、两个串联的一维十通柱选择阀（9d）、18个一维色谱富集柱（9）和一维色谱柱输出管（9b）；所述二维色谱柱系统采用18个一维色谱富集柱（9）之一作为上样柱、连接在六通柱选择阀（6）的5个色谱柱（6b）之一作为分离柱、再依次连接二维色谱柱输入管（10a）、二维十通柱选择阀（10c）及9个二维色谱富集柱（10）和馏分收集器（11）；稀释液泵（3）连接至三通混合器（8）；控制系统与第一泵（1）、第二泵（2）、稀释液泵（3）、二位八通阀（12）、二位六通进样阀（5）、六通柱选择阀（6）、检测仪（7）一维十通柱选择阀（9d）、二维十通柱选择阀（10c）进行电连接，控制系统控制第一泵（1）、第二泵（2）和稀释液泵（3）的开启和停止，控制系统控制二位八通阀（12）、二位六通进样阀（5）、六通柱选择阀（6）、一维十通柱选择阀（9d）、二维十通柱选择阀（10c）的通断切换；所述色谱仪通过控制二位八通阀（12）的连接呈第一连接状态或第二连接状态，实现分离方法开发、样品一维和二维色谱分离；所述第一连接状态分为样品分离方法开发状态与样品的一维色谱分离状态；样品分离方法开发状态为泵入系统输入管（4a）与A口连接，经B口与进样系统输入管（5a）连接，C口与进样系统输出管（5b）连接，D口与检测系统输入管（6a）连接，六通柱选择阀（6）的六通柱选择阀支管（6c）进入检测系统，经三通混合器（8）、检测系统输出管（8a）、进入G口后由H口经一维色谱柱输出管（9a）、一维色谱柱公共通路（9c）和一维色谱柱输出管（9b）进入F口，经E口进入二维十通选择阀（10c）的二维色谱柱公共通路（10b）连接至馏分收集器（11）；样品的一维色谱分离状态为泵入系统输入管（4a）与A口连接，经B口与进样系统输入管（5a）连接，C口与进样系统输出管（5b）连接，D口与检测系统输入管（6a）连接，六通柱选择阀（6）的5个色谱柱（6b）之一进入检测系统，经三通混合器（8）、检测系统输出管（8a）进入G口后由H口经一维色谱柱输出管（9a）、由一维十通选择阀（9d）选择的1个一维色谱富集柱（9）和一维色谱柱输出管（9b）进入F口，经E口进入二维十通选择阀（10c）的二维色谱柱公共通路（10b）连接至馏分收集器（11）；同时，稀释液泵（3）、三通混合器（8）、检测系统输出管（8a）连接至G口；所述第二连接状态为泵入系统输入管（4a）与A口连接，经H口与一维色谱柱输入管（9a）连接，再经一维十通选择阀（9d）选择串联18个一维色谱富集柱（9）的其中1个作为上样柱，经一维色谱柱输出管（9b）进入E口，D口经检测系统输出管（6a）与六通柱选择阀（6）的其中1个色谱柱（6b）串联后分离，进入检测系统（7），经三通混合器（8）、检测系统输出管（8a）、进入G口后由F口经二维色谱柱输入管（10a）和由二维十通选择阀（10c）选择的1个二级富集柱（10）串联富集后连接至馏分收集器（11）。