一种纤维素酶的液态发酵生产方法

摘要

本发明公开了一种纤维素酶的液态发酵生产方法，其特征在于，包括一次发酵和二次发酵过程。本发明采用二次发酵酶液的方法优化了纤维素酶发酵工艺路线，缩短了在相同发酵时间内比现有发酵工艺获得相同酶活力的发酵时间，使得酶制剂产品质量提高、生产成本降低，更利于实现工业化生产。而且，本发明方法生产工艺简单、操作简便、技术方法容易掌握，且添加剂来源即为经过过滤处理后的自身发酵酶液，不需要另外购进添加剂而增加成本。

主权项

一种纤维素酶的液态发酵生产方法，其特征在于，包括一次发酵过程和二次发酵过程，其中，所述一次发酵过程为：(1)向一次发酵培养基中加入纤维素酶产生菌A进行一次发酵，所述一次发酵培养基以纤维素为底物，当一次发酵液的滤纸酶活为10‑20IU/ml时停止发酵，得到一次发酵液，(2)除去一次发酵液中的纤维素酶产生菌A的菌丝残片以及孢子，得到一次酶液；所述一次发酵过程中的步骤(2)中，将一次发酵液在800～1200rpm下离心4～6min后，再用0.22～0.8μm的滤膜过滤，得到所述一次酶液；所述一次发酵过程中的步骤(1)中，将经纤维素酶产生菌A培养获得的种子液与一次发酵培养基按照体积比为1∶20～1∶100进行接种，在22～28℃条件下发酵72～132h；所述二次发酵过程为：(1)分别向二次发酵的二次发酵培养基中加入一次酶液和纤维素酶产生菌B，从而构成发酵体系，其中，一次酶液的添加量为使所述发酵体系中滤纸酶活为0.03～1IU/ml，(2)在所述发酵体系中进行发酵，以生产纤维素酶；所述二次发酵过程中所述一次酶液的添加量为使所述发酵体系中滤纸酶活为0.5～0.7IU/ml；所述纤维素酶产生菌A与所述纤维素酶产生菌B为同一种的菌种，且所述纤维素酶产生菌B为里氏木霉；或者所述纤维素酶产生菌A与所述纤维素酶产生菌B为不同种的菌种，其中，所述纤维素酶产生菌A为桧状青霉，所述纤维素酶产生菌B为里氏木霉。