发明名称 一种快速检测红花注射液综合毒性的生物测试方法
摘要 本发明公开了一种快速检测红花注射液综合毒性的生物测试方法,包括如下步骤:(1)制备测试用菌液:取发光细菌冻干粉,用氯离子浓度为0.1‑1.0mol/L的溶液复苏,得测试用菌液;(2)检测:取待检红花注射液样品,用测试用菌液检测,确定发光强度抑制率为50%的样品稀释度以及稀释度‑效应动力曲线。本发明方法检测准确度和灵敏度均较高,操作简单。
申请公布号 CN103868915B 申请公布日期 2016.08.17
申请号 CN201410113782.X 申请日期 2014.03.25
申请人 四川省中医药科学院;雅安三九药业有限公司 发明人 赵军宁;鄢良春;朱雅宁;赵炳祥
分类号 G01N21/76(2006.01)I 主分类号 G01N21/76(2006.01)I
代理机构 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 代理人 李高峡;张娟
主权项 一种快速检测红花注射液综合毒性的生物测试方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)制备测试用菌液:取发光细菌冻干粉,用氯离子浓度为0.1‑1.0mol/L的溶液复苏,得测试用菌液;(2)检测:取待检红花注射液样品,用测试用菌液检测,确定稀释度‑效应动力曲线以及发光强度抑制率为50%的稀释度;步骤(1)中,所述含氯离子的溶液的pH为5~9;步骤(2)所述检测的方法如下:a、预测试:取待检红花注射液样品,用水稀释成5个梯度的待检液,体积百分比分别是:100%、25%、6.25%、1.5625%、0.39%,以氯离子浓度为0.51mol/L的溶液为标准液,在所述待检液和标准液中加入测试用菌液,菌液加入量为待检液或标准液体积的1/25~1/15,放置5~30min,检测发光强度,计算5个稀释度的发光度抑制率;b、确定检测稀释度的上限及下限:根据步骤a的结果,以抑制率为90~100%的任一稀释度为上限,若样品原液的抑制率未达到90%,则以样品原液为上限;以抑制率为0~10%的任一稀释度为下限;c、测试:在步骤b确定的稀释度上限和下限之间增配6~9个均匀稀释梯度的待检液,以氯离子浓度为0.51mol/L的溶液为标准液,在所述待检液和标准液中加入测试用菌液,菌液加入量为待检液或标准液体积的1/25~1/15,放置5~30min,检测发光强度,制作稀释度‑效应动力曲线,计算抑制率为50%的稀释度;步骤a和步骤c中,所述待检液中加有含氯离子的溶液,待检液中氯离子的终浓度为0.51mol/L。
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