主权项 |
一种萌发菌液体菌种菌丝球碎化处理方法,其特征在于:包括以下步骤:1)制备母种:将菌种块接种到试管PDA培养基中,置于25℃环境中避光培养11天;所述的PDA培养基包含马铃薯200份、葡萄糖30份、蛋白胨15份、琼脂40份和水1000份;PDA培养基在1.3~1.7kPa下进行密闭灭菌30min,其pH值设置在5.6~5.9;2)摇瓶静置培养:将步骤1)中培养的母种切成3~5mm的小块,用接种刀挑起菌丝体部,接种到摇瓶中,并使其悬浮在液面上,每瓶接入量为5~10块,将接好种的摇瓶静置放在27℃的恒温箱中培养11天;所述的摇瓶培养液由蛋白胨0.2%,葡萄糖0.1%,磷酸二氢钾0.01%,硫酸镁0.01%,牛肉膏0.01%,维生素B1、B2各0.1克,加20%马铃薯汁组成;其pH值设置在5.6~5.9;3)摇瓶震荡培养:将步骤2)中摇瓶静置培养放在频率为200r/min、温度26℃的震荡摇床上培养,使菌种在摇瓶中震荡培养8天,得到直径为2cm左右的菌丝球;4)碎化处理:将步骤3)中培养好的摇瓶转移到频率为500r/min的电磁搅拌器上作8个周期搅拌,得到40~60%的碎化菌丝体;5)接种:将碎化菌丝体接入固体栽培袋,在26℃黑暗条件下培养34天可得到栽培用种。 |