TAL效应子介导的DNA修饰

摘要

提供涉及基因靶向（例如，用转录激活因子样效应子核酸酶的基因靶向）的材料和方法。

主权项

一种用于修饰细胞的遗传物质的方法，所述方法包括：(a)提供含靶DNA序列的细胞；和(b)将第一和第二转录激活因子样效应子内切核酸酶单体，即TAL效应子内切核酸酶单体，引入细胞，所述第一和第二TAL效应子内切核酸酶单体各包括：(i)FokI内切核酸酶结构域，和(ii)含有多种TAL效应子重复序列的TAL效应子结构域，其中所述第一TAL效应子内切核酸酶单体的多种TAL效应子重复序列一起结合所述靶DNA序列中第一特定核苷酸序列，且其中所述第二TAL效应子内切核酸酶单体的多种TAL效应子重复序列一起结合所述靶DNA序列中第二特定核苷酸序列，其中所述第一和第二特定核苷酸序列各自长度为最少15碱基且方向为5’到3’，其5’末端前紧接T；其中所述第一特定核苷酸序列和所述第二特定核苷酸序列不同且由间隔区分开，且其中所述第一TAL效应子内切核酸酶单体和所述第二TAL效应子内切核酸酶单体形成二聚体，所述二聚体在所述第一TAL效应子内切核酸酶单体结合所述第一特定核苷酸序列且所述第二TAL效应子内切核酸酶单体结合所述第二特定核苷酸序列时切割细胞内的所述靶DNA序列。