目标区域测序文库构建方法

摘要

本发明提供一种构建目标区域测序文库的方法，包括：获取待测样本中的核酸，所述核酸由多个核酸片段组成；末端修复所述核酸片段，获得末端修复片段；加碱基A至所述末端修复片段的两端，获得粘性末端片段；连接接头于所述粘性末端片段的两端，获得接头连接片段；对所述接头连接片段进行第一扩增，获得第一扩增产物；利用试剂盒对所述第一扩增产物进行捕获，获得所述目标区域；以及对所述目标区域进行第二扩增，获得第二扩增产物，所述第二扩增产物即为所述目标区域测序文库；其中，所述试剂盒包含探针，所述探针能够特异性识别表1里的547个基因中的至少10个基因的基因区域。本发明还公开了一种测序方法、目标区域变异检测方法及其装置。

主权项

一种构建目标区域测序文库的方法，其特征在于，包括：(a)获取待测样本中的核酸，所述核酸由多个核酸片段组成，所述核酸片段来自断裂的基因组DNA和/或游离的DNA；(b)末端修复所述核酸片段，获得末端修复片段；(c)加碱基A至所述末端修复片段的两端，获得粘性末端片段；(d)连接接头于所述粘性末端片段的两端，获得接头连接片段；(e)对所述接头连接片段进行第一扩增，获得第一扩增产物；(f)利用试剂盒对所述第一扩增产物进行捕获，获得所述目标区域；以及，(g)对所述目标区域进行第二扩增，获得第二扩增产物，所述第二扩增产物构成所述目标区域测序文库；其中，所述试剂盒包含探针，所述探针能够特异性识别以下预定区域：表1里的547个基因中的至少10个基因的基因区域；任选的，所述预定区域为所述547个基因中的至少20个基因的基因区域；任选的，所述预定区域为所述547个基因中的至少40个基因的基因区域；任选的，所述预定区域为所述547个基因中的至少80个基因的基因区域；任选的，所述预定区域为所述547个基因中的至少160个基因的基因区域；任选的，所述预定区域为所述547个基因中的至少320个基因的基因区域；任选的，所述预定区域为所述547个基因中的表2所列145个基因的基因区域；任选的，所述预定区域为所述547个基因中的表3所列60个基因的基因区域；任选的，所述预定区域为所述547个基因中的表4所列43个基因的基因区域；任选的，所述预定区域为所述547个的基因区域。