一种流式细胞仪定量检测蛋白质浓度的方法

摘要

本发明公开一种流式细胞仪定量检测蛋白质浓度的方法，联合荧光免疫磁性微球和流式细胞仪检测特异性蛋白质浓度，具体方法包括制备荧光磁性微球；制备荧光检测抗体；制备荧光免疫磁性微球和校准磁性微球；制作标准品工作曲线并通过未知样品平均荧光强度获得实际蛋白质浓度，本发明将流式细胞术与荧光免疫磁性微球相结合检测蛋白质浓度，采用该方法进行特异性蛋白质分子浓度检测，反应体系小，测量更精准，检测下限为pg/ml级，具有较高的特异性和敏感性，操作更方便快捷，操作步骤简化，直接孵育无需分步孵育洗涤，缩短反应时间，检测结果时间更短，定量更精确。

主权项

一种流式细胞仪定量检测蛋白质浓度的方法，其特征在于：联合荧光免疫磁性微球和流式细胞仪检测特异性蛋白质浓度，具体包括以下步骤：步骤(1)：将荧光染料修饰在磁性微球上制备荧光磁性微球；步骤(2)：将荧光基团交联在蛋白质特异的单克隆抗体上制备荧光检测抗体；步骤(3)：将步骤(1)获得的荧光磁性微球表面进行氨基化和酰胺‑羧基化修饰，再分别将该蛋白质不同荧光检测抗体对应表位的特异性单克隆抗体和特定荧光标记量的荧光检测抗体交联在活化的荧光磁性微球表面，制成荧光免疫磁性微球和校准磁性微球；步骤(4)：制作标准品工作曲线并通过未知样品平均荧光强度获得实际蛋白质浓度。