一种检测和鉴定沙门氏菌1,4,[5],12:i:-的方法

摘要

本发明公开了一种检测和鉴定沙门氏菌1,4,[5],12:i:-的方法。它对待检的沙门氏菌菌株进行O和H抗血清凝集反应，鉴定出菌株完整的O抗原，并且当遇到第Ⅱ相H抗原为阴性时，采用第Ⅰ相H抗原“Hi”进行鞭毛诱导实验，如果诱导实验结果显示第Ⅱ相H抗原为阴性时，确定为疑似菌株；提取疑似菌株的DNA，采用引物一、二和三进行多重PCR反应，如果多重PCR反应产物中同时出现1389bp、1000bp、261bp条带，则证明菌株是鼠伤寒沙门氏菌，如果多重PCR反应产物中只含有1000bp、261bp条带或仅出现261bp条带，则确认疑似菌株为沙门氏菌1,4,[5],12:i:-，出现其它的带型组合则是其它沙门氏菌。本方法操作简单，成本低廉，反应快速，高效，准确，无环境污染，是食品常规检测或疾病暴发检测的重要快速检测工具。

主权项

一种非疾病的诊断和治疗目的的检测和鉴定沙门氏菌1,4,[5],12:i:‑的方法，其特征在于，包括以下步骤：a、血清分型初步确定单相菌抗原式：对待检的沙门氏菌菌株进行O和H抗血清凝集反应，鉴定出菌株完整的O抗原，并且当遇到第Ⅱ相H抗原为阴性时，采用第Ⅰ相H抗原“Hi”进行鞭毛诱导实验，如果诱导实验结果显示第Ⅱ相H抗原为阴性时，确定为疑似菌株；b、提取疑似菌株的DNA，采用下述表中的引物一、二和三进行多重PCR反应，如果多重PCR反应产物中同时出现1389bp、1000bp、261bp条带，则证明菌株是鼠伤寒沙门氏菌，如果多重PCR反应产物中只含有1000bp和261bp条带，则确认疑似菌株为沙门氏菌1,4,[5],12:i:‑，出现其它的带型组合则是其它沙门氏菌；