一种发酵生产混合醇的方法

摘要

本发明公开了一种发酵生产混合醇的方法。本发明通过调控胞内还原性辅因子（NADPH/NADH）供给水平实现异丙醇、丁醇和乙醇的高效联产。由于异丙醇的合成，菌体在产醇期还原力需求增大，尤其是NADPH，造成胞内还原力供给失衡，在进行厌氧发酵时，总醇产量仅3.88g/L，细胞生长较差，最高细胞量OD₆₀₀值达到4.19。通过在发酵培养基中添加2g/L氯化钙，促进NADH向NADPH转化，恢复了细胞生长和混合醇的合成，混合醇产量有较大的提高。通过在发酵培养基中添加10g/L的碳酸钙，不仅改善了发酵培养基的pH同时有利于产醇的进行，加强了异丙醇通路的NADPH供给，提高了混合醇的总产量。利用本发明发酵生产混合醇的方法，能提高混合醇的生产强度及产量。

主权项

一种发酵生产混合醇的方法，其特征在于：所述方法分两步进行，具体如下：第一步构建重组菌株：选用丙酮丁醇梭菌为出发菌株，将表达载体pIMP1‑ptb‑sadh导入到出发菌株中，获得表达sadh基因的重组菌株；第二步生产混合醇：将重组菌株接入种子培养基中，通入氮气培养，在发酵培养基中加入钙离子或碳酸钙进行厌氧发酵。