一种从福尔马林固定石蜡包埋组织分离DNA和RNA的试剂盒及方法

摘要

本发明提供了一种从福尔马林固定石蜡包埋组织分离DNA和RNA的试剂盒及方法。本发明所述试剂盒可用于FFPE样本中DNA和RNA的同时提取，其优点不仅在于可以同时进行核酸提取，节省时间，经济，快速，而且本发明可节约样本量，能有效解决试验中缺少样本的难题，还可以保证研究中使用的DNA和RNA的来源完全相同。本发明操作简捷，重复性高，得率高，2～5片肿瘤组织切片即可同时获得足够的DNA和RNA；获得的核酸纯度高，对后续的检测无干扰；与常用试剂盒相比，具有明显的优势。

主权项

一种从福尔马林固定石蜡包埋组织中共分离DNA和RNA的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒由以下组分组成：(1)RNA分离裂解液Buffer RTL：200mM的Tris·Cl，1M的EDTA，200mM的二硫苏糖醇，10％(V/V)Tween 20，0.5％(V/V)的十二烷基硫酸钠；结合液Buffer RTB：100mM的Tris·Cl，200mM的EDTA，1M的KCl，1M的NaCl，0.2％(V/V)的十二烷基硫酸钠，10％(V/V)的Tween 20，6M的异硫氰酸胍；DNase I工作混合液：DNase I Magic Buffer：其为100mM的Tris·Cl，50mM的NaCl，80mM的MgCl₂组成，DNase I 3U/μL；漂洗液Buffer RTW：300mM的Tris·Cl，50mM的EDTA，1M的NaCl，10％乙醇；洗脱液Buffer RTE：10mM的Tris·Cl，5mM的EDTA；(2)DNA分离裂解液Buffer DTL：100mM的Tris·Cl，50mM的EDTA，100mM的二硫苏糖醇，5％(V/V)十二烷基硫酸钠，20％(V/V)的Tween 20；调节液Buffer DES：100mM的Tris·Cl，50mM的EDTA，800mM的(NH₄)₂SO₄，1M的KCl；结合液Buffer DTB：100mM的Tris·Cl，50mM的EDTA，800mM的KCl，5M的异硫氰酸胍；漂洗液Buffer DW1：300mM的Tris·Cl，50mM的EDTA，3M的异硫氰酸胍，56％乙醇；漂洗液Buffer DW2：500mM的Tris·Cl，1M的NaCl，80％乙醇；洗脱液Buffer DTE：10mM的Tris·Cl，5mM的EDTA。